KlenTaq-S Sequenzierungsenzym

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Übersicht

KlenTaq-S Sequenzerase ist eine modifizierte Version der Taq-DNA-Polymerase, die ein großes Segment der Taq-DNA-Polymerase ist und eine genetische Mutation durchführt. Dieses Enzym besitzt 5'→3' Polymerase-Aktivität, keine 5'→3' Extrocitase-Aktivität und 3'→5' Extrocitase-Aktivität.

Produktdetails

Unser Unternehmen KlenTaq-SSequenzierungsenzyme sind rekombinante Proteine, die durch mehrstufige Reinigung mit rekombinanter Expression hergestellt werden.

Definition der AktivitätDie aktive Einheit bezieht sich auf 72℃unten, 1 x AM PCR-Puffer1，30 MinInnengeneral 10 nmole dNTPZur Einmischung der erforderlichen Enzyme für säureunlösliche Substanzen.Merkmal

1. Besonders geeignet ddNTP Modifizierte Nukleotidreaktionen

2. Verglichen mit der gesamten Länge Taq Die DNA Polymerase, das Enzym hat eine geringere Aktivität.

Anwendungsbereich

ddNTP KündigungsgesetzDie DNA Sequenzierung (Generationssequenzierung）

Pyrophosphatolyse-Erweiterungsmethode SNP Analyse

Qualitätskontrolle

Durch strenge Qualitätskontrollen wird sichergestellt, dass das Produkt die höchste Wirksamkeit und Reinheit hat.

Enzymlagerpuffer

20 mM Tris-HCl (pH 8,0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,5 % Nonidet P40, 0,5 % Tween20 und 50 % Glycerin.

Anwendungsbeispiele

Folgende Reaktionen sind Beispiele 50 μlStandard PCRSystem, nur zur Referenz. Praktisch PCRDie Bedingungen sollten auf Grundlage der Vorlage, der Vorlage und der Zielsegmentgröße optimiert werden, um die optimalen Reaktionsbedingungen zu bestimmen.

1）Formulation des Reaktionssystems in der folgenden Tabelle

Komponenten	Volumen/ μl	Endkonzentration
10×AM PCR-Puffer 1	5	1×
dNTPs（2,0 mM）	5	0,2 mM
Vorläufer F（10 μM）	1.5	0,3 μM
VorläuferR（10 μM）	1.5	0,3 μM
Vorlage	Veränderbar*	/
KlenTaq-SSequenzierungsenzyme (5U / μl）	0.5	2.5U
ddH2O	variierbar	/
Gesamtvolumen	50	/

* Vorlage-DNA-Dosierungsparameter (50 μl-Reaktionssystem):

Menschliches GenomDNA100-1000 ng ; Mikrobiologische DNA 10-100ng;PCR produziert typisch ärgerten Kanyam; 1 ng-10%； Plasmid-DNA 5-30 ng; cDNA aus RT-Reaktion 1-5 μl.

2）unter folgenden Bedingungen reagieren,

95℃	2-5 Minuten
95℃	15 Sekunden	25-35 Zyklen
55~72℃	20 Sekunden
72℃	1kb/min
72℃	5 Minuten

3）Gelelektrophoresis-PrüfungPCR Produkte oder nachfolgende Operationen zu experimentellen Zwecken.

Hinweise1. PCR Bedingungen und wilde Typen Taq Die DNA Polymerase ähnlich, für bestimmte Die DNA Die Sequenzierungsreaktion muss möglicherweise optimiert werden.2. Das Enzym erweitert Fähigkeit wilder Typ Taq DNA Die Polymerase sinkt,PCR Reduzierte Produktion, nicht für den regulären Gebrauch empfohlen PCR。3. Nicht verfügbar Taqman Sondenmethode q-PCR。

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