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Hydrogenbromgel

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CNBr aktivierte Sepharose 4B$r$n Hydrogen Bromide Gel 4B$r$n Anwendung: Affinität Layer Füllstoff$r$n Verpackung: 15 g

Produktdetails

CNBr aktivierte Sepharose 4B

Hydrogenbromgel4B

Anwendung: Affinitätsschicht Füllstoffe

Verpackung: 15g, 100g, 250g Festverpackung

Um die Leistung und den problemlosen Betrieb des Produkts zu gewährleisten, lesen Sie bitte dieses Handbuch sorgfältig vor der Verwendung und wenden Sie sich bei Fragen an unseren technischen Support oder den lokalen Vertriebspersonal (siehe Anhang).

1. Produkteinführung

CNBr Focurose 4FF ist ein schnellflüssiges Reinigungsmedium, das Cyanatgruppen enthält, nachdem Cyanobrom aktiviert wurde. Es eignet sich für Biomoleküle mit gekoppelten Proteinen, Polypeptiden, Nukleinsäuren und anderen Aminosäuren. Nach wiederholter Prüfung im biomedizinischen Reinigungsprozess wurde es weit verbreitet.

Eigenschaften:

a. weit verbreitet,HydrogenbromgelKann für gekoppelte biologische Makromoleküle mit Amino verwendet werden.

b. Mehrpunktkopplung, einfach, flexibel, schnell, effektiv und effizient zur Aufrechterhaltung der biologischen Aktivität und Stabilität von Biomolekülen.

c. Schnelle Durchflussgeschwindigkeit, hohe Ausbeute und leicht zu vergrößern.

Tabelle 1: Medienleistungsparameter

Substrat	Hoch vernetzte 4% Juice
Partikelgrößenbereich	45-165µm
Durchschnittliche Partikelgröße	90µm
Kombinierte Last	30 mg (Trypsinogen) / ml (Medium)
pH-Stabilität	3-11 (Langfristig) 2-11 (Kurzfristig)
Maximale Durchflussgeschwindigkeit	700 cm/h
Betriebsdruck	≤0,3 MPa
Lagerlösungen	100% Aceton
Lagertemperatur	4-8℃

2. Verbindungsbedingungen

(A) Reinigung

Nehmen Sie die angemessene Menge an Ablagerkleber (ca. 1,0 ml nach der Reinigung von 0,83 g), suspendieren Sie das Medium mit einer 5-fachen Flüssigkeit A und trocknen Sie die Lösung nach 5 Minuten. Wiederholen Sie diesen Schritt fünfmal.

Hinweis: Dieser Schritt wird verwendet, um das Medium zu aktivieren, um sicherzustellen, dass das Reinigungsvolumen der Flüssigkeit A ausreichend ist und die Reinigungszeit auf etwa 0,5 h festgelegt ist (die Gruppen über dem Medium werden zu lange hydrolysiert).

b. Zubereitung der Zuordnungslösung

Die zu koppelnden Biomoleküle werden in B-Flüssigkeit gelöst oder in B-Flüssigkeit ersetzt (Biomolekulare Konzentration 1-10 mg/ml, empfohlen 5 mg/ml).

Hinweis: Stellen Sie sicher, dass die pH- und Salzkonzentration bei der Kopplung mit der Flüssigkeit B übereinstimmt.

c. Verknüpfung

Das gereinigte Medium und die fertige Probe werden in gleichmäßigen Verhältnissen (Volumenverhältnis) gemischt, 3-4 h bei Raumtemperatur erwärmt und vermischt. Nach der Bestimmung des Kupplungserfolgs (Bestimmung der Kupplungseffizienz durch Bestimmung des Biomolekulangehalts vor und nach der Kupplung) wird die Lösung getrocknet.

Hinweis: Die Kopplung wird empfohlen, 3-4 h bei Raumtemperatur zu koppeln. Für instabile Zuordnungen wird eine Übernachtung bei 4-8 ° C empfohlen.

Das gekoppelte Medium wird mit einer 5-fachen Flüssigkeit C wieder suspendiert und die Lösung getrocknet. Wiederholen Sie diesen Schritt dreimal.

Hinweis: Dieser Schritt wird verwendet, um die restlichen Biomoleküle im Medium zu reinigen, um zu reinigen *.

e. geschlossen

Die Lösung wird mit einer 5-fachen Flüssigkeit C wieder suspendiert, bei Raumtemperatur erwärmt und 3-4 Stunden vermischt und getrocknet.

Hinweis: Dieser Schritt wird verwendet, um die Gruppen über dem Medium zu schließen, unter Raumtemperatur zu erwärmen und 3-4 Stunden zu mischen.

f. (D und E) Reinigung

Das geschlossene Medium wird mit einer 5-fachen Flüssigkeit D wieder suspendiert und die Lösung nach 5 Minuten getrocknet; Das Medium wird mit einer 5-fachen E-Flüssigkeit wieder suspendiert und nach 5 Minuten getrocknet. Wiederholen Sie diesen Schritt dreimal.

Hinweis: Dieser Schritt wird verwendet, um Säure und Alkali zu waschen, die nicht eng genug gekoppelte Biomoleküle.

g. Aufbewahrung

Das Medium wird mit einem 5-fachen Volumen von gereinigtem Wasser wieder suspendiert und getrocknet, dann mit einem 5-fachen Volumen von 20% Ethanol das Medium wieder suspendiert und schließlich mit 20% Ethanol eingeweicht und aufbewahrt.

Hinweis: Dieser Schritt dient zur Erhaltung des Mediums, um das Wachstum von Mikroben zu vermeiden.

h. Lösungsformering

A-Flüssigkeit: 0,001 MHCl, 0,5 M NaCl, pH-Wert 3,0 regulieren, 4-8 ° C aufbewahren (vor der Verwendung von A-Flüssigkeit zur Vorkühlung).

B-Flüssigkeit: 0,2 M NaHCO3, 0,5 M NaCl, pH 8,3 reguliert (wenn das gekoppelte Biomolekül IgG ist, pH=8.5-9.0）， Raumtemperatur aufbewahren.

C-Flüssigkeit: 0,1 M Tris-HCl, pH 8,3 reguliert und bei Raumtemperatur aufbewahrt.

D-Flüssigkeit: 0,05 M Tris-HCl, 0,5 M NaCl, pH-Wert 8,5 reguliert, Raumtemperatur aufbewahrt.

E-Flüssigkeit: O.05M GAN-Amin, 0,5 MNaCl, pH-Wert 3,5 regulieren, Raumtemperatur aufbewahren.

F-Flüssigkeit: 1,0 M NaCl, bei Raumtemperatur aufbewahrt.

3. Reinigung

Nach der Reinigung können einige stark bindende Substanzen (z. B. einige stark gebundene Proteine, degenerierte Proteine, Lipide usw.) entfernt werden, um eine ausgezeichnete Leistung des Wiederherstellungsmittels (z. B. Belastung, Flüssigkeit, Säulenwirkung usw.) zu erreichen.

Es wird empfohlen, nach jedem fünften Gebrauch eine Reinigung durchzuführen, wobei die spezifische Reinigungsfrequenz auf die Reinigkeit der gereinigten ersten Probe angepasst werden muss.

1. Regelmäßige Reinigung

a. Spülen Sie mit gereinigtem Wasser mit einem 5-10-fachen Säulenvolumen.

b. Spülen Sie mit einer Flüssigkeit D mit einem 5-10-fachen Säulenvolumen.

c. Spülen Sie mit einer E-Flüssigkeit mit einem 5-10-fachen Säulenvolumen.

d. Spülen Sie mit F-Flüssigkeit mit einem 5-10-fachen Säulenvolumen.

e. Spülen Sie mit gereinigtem Wasser mit einem 5-10-fachen Säulenvolumen.

f. Nach dem Spülen mit 20% Ethanol im 5-10-fachen Säulenvolumen aufbewahren.

2. Intensive Reinigung

a. Nach dem Spülen mit 0,2% nicht-ionischem Entreinigungsmittel mit 2-5-fachem Säulenvolumen wird sofort mit 5-10-fachem Säulenvolumen gereinigtem Wasser gespült.

b. Nach dem Spülen mit 2-5-fachen Säulenvolumen 6M Gwandin, sofort mit 5-10-fachen Säulenvolumen gereinigtes Wasser.

c. Nach dem Spülen mit 20% Ethanol im 5-10-fachen Säulenvolumen aufbewahren.

Hinweis: Die Anwendbarkeit intensiver Reinigungsbedingungen hängt hauptsächlich von der Stabilität der gekoppelten Biomoleküle ab, bevor diese Bedingungen gereinigt werden, wird empfohlen, zuerst ein kleines Vorexperiment zu machen, um die Stabilität der Biomoleküle zu überprüfen.

4. Anwendungsfälle

Fall 1

Fall 2

5. Häufig gestellte Fragen

Tabelle 2: Häufige Fragen und Lösungen

Problem	Mögliche Gründe	Lösungen
Niedrige Verbindungseffizienz	B. Falsche Salzkonzentration oder pH	Prüfung der richtigen Zubereitung der Flüssigkeit B
	2. Nicht ausreichende Verbindungszeit	Verlängerung der Verbindungszeit
	3. Voraktivierte Füllstoffe sind nicht geeignet	Versuchen Sie andere Arten von Voraktivierungsfüllstoffen
Das Ziel wird bei der Reinigung nicht mit dem Medium verbunden. oder geringere Kombination	1. Überlastung der Probe	Probenmenge reduzieren
	2. Zu schnell	Senken Sie die Durchflussgeschwindigkeit
	3. Proteine oder Lipide im Medium sammeln	Medien rechtzeitig und effektiv reinigen
	4. Die Probe wird während der Lagerung oder Aufnahmeprozess deaktiviert	Zur Aufrechterhaltung der Aktivität der zu reinigenden Probe richtig speichern
	5. Niedriges Verhältnis von Zuordnung und Zielverbindung	Versuche, die Konzentration der Basis zu erhöhen, wenn gekoppelt
	6. Abbau der Zuordnungsmittel bei der Kopplung oder Reinigung	Ermittlung der Stabilität des Zuordnungsmittels bei Kopplung oder Reinigung
Bei der Entfernung wurden keine Zielobjekte gesammelt. Oder nur eine kleine Anzahl von Objekten sammeln.	1. Das Ziel ist nicht mit dem Medium verbunden oder bindet sich weniger	Verringerung der Durchflussgeschwindigkeit und Überprüfung der Verbindungsfähigkeit des Mediums
	2. Die Reinigungsbedingungen sind ungeeignet	Änderung der entsprechenden Entfernungsbedingungen oder Verbesserung der Entfernungsfähigkeit der Entfernungsflüssigkeit
	3. Aggregierte Niederlage des Ziels unter Abwasserbedingungen	Ermittlung der Stabilität des Ziels unter Abwasserbedingungen (Salzkonzentration und pH usw.)
Niedrige Reinheit des Ziels	1. Die Probe wurde nicht vorbehandelt	Die Probe muss vor der oberen Säule zentrifiziert oder gefiltert werden.
	2. Zu hohe Viskosität der Probe	Verdünnen Sie die Probe entsprechend mit der Gleichgewichtsflüssigkeit, um die Viskosität zu reduzieren.
	3. Nicht waschen*	Erhöhen Sie das Waschvolumen, bis die Ausgangslinie glatt und konsistent mit der Gleichgewichtsflüssigkeit ist
	4. Verunreinigungsproteine oder Lipide, die sich im Medium absetzen	Medien rechtzeitig und effektiv reinigen
	5. Die Abwaschbedingungen sind schlecht, die Abwaschgeschwindigkeit ist zu schnell und der Gradient ist zu steil.	Anpassung der Reinigungsbedingungen
	6. Zerfall des Ziels	Ermittlung der Stabilität des Ziels
	7. Schlechte Füllwirkung	Nachfüllen oder kaufen
	8. Nichtspezifische Adsorption von Verunreinigungen	Richtige Auswahl von Additiven zur Reduzierung der nicht spezifischen Adsorption
	9. Größeres Speichervolumen an der Oberseite der Trennsäule	Neumontage oder Reduzierung des Probenvolumens
	Mikrobielles Wachstum im Medium	Bitte stellen Sie nach der Verwendung des Mediums rechtzeitig sicher
Medienbelastung sinkt	1. Zu schnell	Senken Sie die Durchflussgeschwindigkeit
	2. Proteine oder Lipide sammeln sich im Medium, wodurch die Last sinkt.	Medien rechtzeitig reinigen
	3. Übermäßige Anzahl der Anwendungen, Abfall der Zuordnung	Neue Medien wiederverbinden
	4. Die Probe wird während der Lagerung oder Aufprobung deaktiviert und kann nicht besser mit der Zuordnung kombiniert werden	Zur Aufrechterhaltung der Aktivität der zu reinigenden Probe richtig speichern
Chromatografie steigt langsam	Medien zu fest gefüllt	Neu einbauen
Chromatografikspitze	Medienfüllung zu locker	Neu einbauen
Säulenbett mit Rissen oder getrocknet	Leckage oder Einführung großer Blasen	Überprüfen Sie die Leitungen auf Leckagen oder Blasen und montieren Sie sie neu
Langsamer Flüssigkeitsstrom	1. Protein- oder Lipidaggregation	Medien oder Filterfolien rechtzeitig reinigen
	2. Protein fällt im Medium ab	Anpassung der Gleichgewichts- und Waschflüssigkeitskomponenten, um die Stabilität des Zielobjekts und die Effizienz der Bindung des Mediums aufrechtzuerhalten
	3. Mikrobielles Wachstum in der Trennsäule	Die verwendeten Reagenzien müssen gefiltert und entgasset werden; Die Probe muss vor der oberen Säule zentrifiziert oder gefiltert werden

6. Bestellinformationen

Tabelle 3: Bestellinformationsformular

Produkt	Spezifikationen (ml)	Warennummer
CNBr Focurose 4FF	25	HZ1001-2
CNBr Focurose 4FF	100	HZ1001-2
CNBr Focurose 4FF	500	HZ1001-2
CNBr Focurose 4FF	1000	HZ1001-2

Hinweis: Wenn Sie große Verpackungen oder andere Produkte kaufen möchten, wenden Sie sich bitte an unseren lokalen Vertrieb oder den technischen Support vor dem Verkauf.

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