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Einheit 2, 503, Gebäude 3, Bai Zhan Garden, 128, Maleanwa North Road, Haidian District, Peking
Peking Noboled Technologie Co., Ltd.
Einheit 2, 503, Gebäude 3, Bai Zhan Garden, 128, Maleanwa North Road, Haidian District, Peking
DNA Schnellligationskit
DNA Quick Ligation Kit T4 und andere
Katalognummer:42110
Katalognummer |
Verpackungseinheit |
42110-20 |
20 mal. |
42110-60 |
60 mal |
Komponenten |
42110-20 |
42110-60 |
2 xQuick Ligation Puffer |
100 ml |
300 ml |
Q 4 DNA-Ligase, 5 U /ml |
100 U |
300 U |
Produktlagerung:-20°C Aufbewahren, um zu viele wiederholte Schmelzungen zu vermeiden.
Produktbeschreibung:Diese Kit kann bei Raumtemperatur (22°C) Die Reaktion der klebrigen oder flachen Verbindungen der DNA-Fragmente unter 10 Minuten schnell abzuschließen. Verbindungsprodukte können direkt umgewandelt werden. Kann zum Klonen von DNA-Fragmenten, Bibliotheksbau, TA-Klonen, Linker-Verbindungen usw. verwendet werden.
Merkmal:Schnelle, einfache und klebrige Flachen ermöglichen die Verbindungsreaktion innerhalb von 10 Minuten.
Betriebsschritte:
1. Die Reaktion erfolgt nach dem folgenden System:
5 ml |
2 xQuick Ligation Puffer |
ml |
Vektor-DNA (30-60ng) |
ml |
Insert DNA (dreimal so viel wie die Anzahl der Trägermole, Insert und Trägermolverhältnis 3:1) |
ml |
Steriles Wasser |
1 ml (5 Weiss-Einheiten)ml) |
Q 4 DNA-Ligase |
Endgültiges Volume |
10ml |
In der Regel wird die T4-DNA-Ligase schließlich hinzugefügt, die vollständig vermischt wird, um die Flüssigkeit sofort zentrifugierend auf den Rohrboden zu sammeln.
2. 22°C-Verbindung für 10 Minuten (in der Regel kann in einem PCR-Instrument durchgeführt werden).
Regelmäßig empfohlen 22°C-Verbindungen dauern 5-10 Minuten, > 3kb lange Segment-Verbindungen können auf 30 Minuten verlängert werden. Es wird nicht empfohlen, mehr als 30 Minuten zu verbringen, um die Anzahl der Konverter zu reduzieren.
3. Auf Eis abkühlen und dann direkt umwandeln oder bei -20 lagern°CLagerung auf -20°C, Vor der Umsetzung sollte auf Eis wieder aufgelöst werden und nach vollständiger Mischung umgewandelt werden.
Beschreibung:
1. Die T4-DNA-Ligase sollte vor der Transformation nicht thermisch deaktiviert werden, sonst wird die Transformationseffizienz verringert.
2. DNA-Stücke größer als 4ml, kann 2 x Quick Ligation Buffer erhöht werden, das gesamte Reaktionsvolumen kann entsprechend auf 20 erhöht werdenml, Auf diese Weise können größere DNA-Fragmente in das Verbindungssystem hinzugefügt werden.
DNA Quick Ligation Kit T4 und andere