Das BCA-Prinzip besteht darin, dass bivalente Kupferionen unter alkalischen Bedingungen durch Proteine zu monovalenten Kupferionen reduziert werden können, wobei monovalente Kupferionen mit * BCA-Lösung A (BCA enthaltend) interagieren, um empfindliche Farbreaktionen zu erzeugen. Zwei Moleküle BCA chelieren ein Kupferion und bilden einen violetten Reaktionskomplex. Dieser wasserlösliche Komplex zeigt eine starke Absorptionsfähigkeit bei 562 nm, die eine gute lineare Beziehung zwischen Absorptionsfähigkeit und Proteinkonzentration in einem breiten Bereich hat, so dass die Proteinkonzentration anhand der Absorptionswerte berechnet werden kann.