Tromboxin M1 Immunaffinitätssäule

Total Aflatoxins M1 Immunaffinitätssäule Bedienungsanleitung

[Zusammenfassung]

Aflatoxin (Aflatoxin) ist ein sekundäres Stoffwechselprodukt, das von Pilzen wie Aflatoxin und Parasitschimmel erzeugt wird, das von der Krebsforschungsagentur der Weltgesundheitsorganisation in die Kategorie 1 von Krebserzeugern unterteilt wird, und ist eine giftige Substanz, die in einer Vielzahl von Lebensmitteln weit verbreitet ist. Getreide wie Mais, Erdnüsse, Reis, Weizen und ihre Nebenprodukte sind die wichtigsten Quellen von Tromboxin, während Tromboxin B1 in Futtermitteln nach dem Stoffwechsel von Tieren produziert wird, Tromboxin M1 ist immer noch sehr giftig und krebserregend und ist auch weit verbreitet in Milch, Blut, Gewebe und anderen Lebensmitteln. Trabamycin als eine der drei Hauptursachen für Leberkrebs ist auch die Hauptursache für Krankheiten wie Magenkrebs und Darmkrebs und stellt eine große Bedrohung für die menschliche Gesundheit dar. In allen Ländern der Welt gelten strenge Bestimmungen für Tramboxin in Nahrungsmitteln und Futtermitteln*. Die am 1. Juni 2010 in Kraft tretenden nationalen Milchsicherheitsstandards bestimmen die Prüfung von Traktoxin M1 in Milch und Milchprodukten, die hauptsächlich verwendete Prüfvorbehandlungsmethode ist die Immunaffilitätssäulenreinigung.

[Anwendungsbereich und Leistung]

Unsere Produktreihe von Mycotoxin-Immunsäulen wird als eine leistungsstarke Immunaffinitätssäule getestet, die für die Reinigung (Reinigung) oder Konzentration von Proben vor der Durchführung von HPLC (High-Efficiency Fluid Chromatography), GC-MS (Gaschromatography-Massenspektrometry), ELISA (Enzyme-Linked Immunoadsorbent Determination) entwickelt wurde.

Zur qualitativen und quantitativen Prüfung von Tramboxin M1 in Proben wie Milch, Milchpulver, Gärmilch, Käse, Sahne usw. sowie zur Vorbehandlung der Probe.

Säulenkapazität: ≥100ng

Recyclingquote: ≥90%

[Prüfprinzip]

Die Grundlage für die Bestimmung dieses Produkts ist die Antigen-Antikörper-Reaktion, der monoklonale Antikörper von Tramboxin M1 wird auf dem Gel in der Kolonne angeschlossen, das Tramboxin M1 in der Probe wird extrahiert, filtriert und verdünnt, dann wird die Probenextraktflüssigkeit langsam durch die Tramboxin M1-Immunaffinitätssäule durchgeführt, in der Immunaffinitätssäule wird das Toxin an den Antikörper gebunden, danach wird die Immunaffinitätssäule gewaschen, um andere Substanzen zu entfernen, die nicht gebunden wurden. Tromboxin M1 mit Methanol abwaschen und dann in das Analysegerät zur Detektion injizieren.

[Verpackungszusammensetzung]

Tromboxin M1 Standard (optional)

25 Stück / Karton, 3ml Zylinder / Stück

Produktbeschreibung 1

[Notwendige und nicht bereitgestellte Geräte und Reagenzien]

Ausrüstung:

Hochgeschwindigkeits-Homogenizer oder Gewebe-Homogenizer

Zerkleinerer

┅┅200mL/50mL Messgerät

Waage: 0,1 g

Säuremessgerät

Flüssigkeitsverteilungstreicher

Spurenpipette: Einkanal 100mL bis 1000mL

┅┅Schlitzfilterpapier (Falten Sie schnell qualitatives oder quantitatives Filterpapier)

50ml Trichter

Rotationsverdampfer

Einwegglas-Prüfrohr

Pumpenströmungsbedienungshalter (einschließlich Luftpumpen, Glasspritzen mit unterschiedlichem Volumen usw.)

Gläser, Flaschen, Kegelflaschen usw.

Reagenzien:

Methanol (Chromatografie)

Acetonitril (Chromatografie)

Ölether

Destillationswasser oder deionisiertes Wasser

2 g* der Lösung (0,5 Mol/L) in 100 ml Wasser gelöst

[Schritt zur Probenbehandlung]

a) Milch

100 ml Milchbad auf 40 oC erhitzen;

┅┅4000r / min Zentrifugieren 15min, sammeln 50ml klare Flüssigkeit für den Gebrauch

(2) Milchpulver und pulverförmige Säuglingsnahrungsmittel

Weigen Sie 10 g Milchpulverprobe, fügen Sie 100 mL 50 oC Wasser mehrmals in kleinen Mengen hinzu und rühren, damit das Milchpulver vollständig gelöst ist

┅┅6000r / min Zentrifugieren 15min, sammeln 50mL klare Flüssigkeit zur Verwendung

60 g gemischte Probe abwägen und den pH mit einer 0,5 mol/L* Lösung auf 7,4 unter Anweisung des Säuremessers senken;

Homogenisierung mit einem Hochgeschwindigkeits-Homogenizer bei 9500 U/min 5 min

Wasserbad auf 40 oC erwärmt;

┅┅4000r / min Zentrifugieren 15min, sammeln 50ml klare Flüssigkeit für den Gebrauch

4) Käse

5 g der Probe, die durch ein feines, über 10-Augen-Rundloch-Sieb gemischt wurde, in einem 50 ml Zentrifugerrohr mit 2 ml Wasser und 30 ml Methanol gelegt wird;

┅┅Homogenisierung mit einem Hochgeschwindigkeits-Homogenizer bei 9500r / min 5 min;

Ultraschallextraktion 30 min;

Zentrifugieren Sie bei 6.000 r/min für 15 min, sammeln Sie die Oberflüssigkeit und verschieben Sie sie in einen 250 ml Partitionstreicher.

┅┅30 ml Ölether (4.3) in den Trenntrachter geben und 2 min schütteln;

Nach der Schichtung wird die untere Schicht in eine 50 ml Becher verschoben und die Öletherschicht entfernt.

Extrahieren Sie zweimal mit Ölether.

Die untere Lösung in eine 100 ml Rundbodenflasche verschieben und auf etwa 2 ml unter Druck konzentrieren; die Konzentration in ein Zentrifugerrohr gießen, die Flasche zweimal mit Acenitril-Wasserlösung (1 + 4) 5 ml waschen und die Waschflüssigkeit zusammen in ein 50 ml Zentrifugerrohr gießen;

Mit Wasser auf ca. 50 ml verdünnen, bei 6.000 U/min 5 min zentrifugieren und zur Reinigung aufbringen.

5) Creme

Die 5G-Probe wird in einem 50 ml Glas gelegt.

Es wird mit 20 ml Ölether gelöst und in eine 250 ml kegelförmige Flasche versetzt.

20 ml Wasser und 30 ml Methanol hinzufügen und nach 30 min Schwingung die gesamte Flüssigkeit in den Trenner verschieben;

Nach der Schichtung wird die gesamte untere Lösung in eine 100 ml Rundbodenflasche verschoben, auf ca. 5 ml im Rotationsverdampfer reduziert und auf ca. 50 ml mit Wasser verdünnt, um gereinigt zu werden.

[Affinitätssäulen Reinigung Schritte]

Verbinden Sie die Immunaffinitätssäule unter einer 50,0 ml Glasspritze. Genau 50,0 ml klare Flüssigkeit in eine Glasspritze zu transportieren;

Verbinden Sie die Luftdruckpumpe mit der Glasspritze und regulieren Sie den Druck, damit die Lösung langsam durch die Immunaffinitätssäule mit einer Durchflussgeschwindigkeit von etwa 2-3 ml / min passiert, bis 2 ~ 3 ml Luft durch die Säule passiert;

Ersetzen Sie die 10 ml Glasspritze mit der Affinitätssäule, fügen Sie 10 ml Wasser in die Spritze hinzu und regulieren Sie den Druck, damit das Wasser die Affinitätssäule mit einer Durchflussgeschwindigkeit von etwa 6 ml / min reinigt.

Präzise hinzufügen 4mL chromatografische Grad Acenitril Wasch, Durchflussgeschwindigkeit von 1 mL / min ~ 2mL / min, sammeln Sie die gesamte Waschflüssigkeit in einem Glas-Prüfrohr für den Test.

[Urteil]

Nach der Reinigung durch die Immunaffinitätssäule kann die gesammelte Acenitrilwaschlösung direkt mit einem Fluoreszenzmeter oder HPLC oder mit einer dünnschichtigen Chromatografie oder einem enzymbundenen Immunreagenskitt untersucht werden. Der Gehalt an Tromboxin in der gesammelten 4 ml Waschlösung entspricht dem Gehalt an Tromboxin M1 in 50 ml Milchproben, fermentierten Milchproben oder 5 g Milchpulverproben, Käseproben und Sahneproben.

Wenn die HPLC-Erkennung ein anderes Lösungsmittel erfordert, kann Acenitrilwasserstoff getrocknet und wieder gelöst werden.

[Achtung]

Gelbmüthoxin ist sehr gefährlich und sollte Handschuhe tragen.

Die verwendeten Glasbehälter und die Yellowmycin-Lösung sollten am besten über Nacht mit einer Natriumhypochlorat-Lösung in einer Konzentration von 5% eingeweicht werden.

Verwenden Sie keine Immunaffinitätssäulen, die das Gültigkeitsdatum abgelaufen haben.

(Lagerbedingungen und Aufbewahrungsdauer)

Lagerbedingungen: Affinitätssäule 2-8 ° C aufbewahrt, kann nicht gefriert werden.

Haltbarkeit: Das Produkt ist 12 Monate gültig.