Basisflaschen kultivierenDie Eröffnung des mikrobiologischen Experiments und der Zellkultur ist die erste Linie, deren Betriebsnormen die Erfolgsquote der nachfolgenden Experimente direkt bestimmen - eine falsche Bedienung kann zu einer Kontamination des Kulturmediums, einem Ausfall der Komponenten und sogar zu Sicherheitsrisiken für die Experimentierenden führen. Das Kernprinzip besteht darin, die „sterile Kontrolle“ und die „Betriebssicherheit“ festzuhalten und einen vollständigen, standardisierten Prozess von der Vorbereitung bis zum Ende aufzubauen.
Die Vorbereitung ist die Grundlage der sterilen Garantie. Die experimentelle Umgebung muss vor dem Betrieb bestätigt werden: Biosicherheitsschrank oder ultrareiner Arbeitstisch muss 30 Minuten im Voraus UV-Desinfektion öffnen und 20 Minuten nach der Belüftung betrieben werden; Die Experimentierenden müssen sterile Handschuhe und Kleidung tragen, und wenn eine intensive mikrobielle Kultur involviert ist, müssen sie auch Masken und Schutzbrillen tragen. Überprüfen Sie gleichzeitig den Status der Basisflasche: Beobachten Sie, ob der Flaschenkörper nicht gebrochen ist, ob die Dichtfilm intakt ist, ob das Etikett die Mediumtyp, das Sterilisierungsdatum und den Gültigkeitsdatum eindeutig kennzeichnet, wenn der Gültigkeitsdatum überschritten wird oder das Medium trüb, abnorme Niederlage etc. auftritt, muss der direkte Abfall nicht geöffnet werden.
Die Operation wird in drei Schritten genau durchgeführt. Der erste Schritt besteht darin, die Oberfläche zu desinfizieren, die Kultivflasche in die Mitte des Arbeitstisches zu legen, mit einem sterilen Garb mit 75% medizinischem Alkohol zu tauchen, die Oberfläche des Flaschenkörpers und den Flaschendeckel in der Flaschenmünde zu streichen, den Schwerpunkt auf die Desinfektion des Flaschendeckels und der Flaschenkörper zu konzentrieren, um Staub oder Mikroben zu vermeiden. Warten Sie, bis der Alkohol vollständig flüchtig ist, um zu verhindern, dass Alkoholreste in das Medium vermischt werden, um das Wachstum von Zellen oder Mikroben zu beeinflussen.
Der zweite Schritt besteht darin, den Flaschendeckel zu öffnen und den gesamten Zeitraum "nach unten geneigt" zu halten, um zu vermeiden, dass Schadstoffe in der Luft fallen, wenn der Flaschenmünd nach oben geht. In der einen Hand halten Sie den unteren Teil des Flaschenkörpers fest, die andere Hand mit dem Daumen und dem Zeigefinger den Flaschendeckelrand knüpfen, langsam entgegen den Uhrzeigersinn drehen, nach der Entspannung des Flaschendeckels drehen, nicht alle entfernen, den Verbindungszustand von 1-2 Runden des Gewindes beibehalten, den möglichen Druck in der Flasche langsam freisetzen - besonders achten Sie auf die Kultivflasche nach der Sterilisation mit hohem Druck, nach der Sterilisation mit hoher Temperatur kann sich ein negativer Druck im Inneren bilden, plötzlich öffnen, was zu einem schnellen Eindringen von Außenluft führt.
Der dritte Schritt ist die sekundäre Desinfektion der Flaschenmünde und der Betrieb, nach dem Entfernen des Flaschendeckels, sofort mit einer sterilen Pinzette, um ein neues steriles Garben mit Alkohol zu tauchen, schnell die Innenseite der Flaschenmünde und den Gewinde abwischen, und dann den Flaschendeckel umgekehrt in den sterilen Betriebsbereich legen (der Flaschendeckel ist nach oben gerichtet, um Kontak mit Verschmutzung zu vermeiden). Die Kulturflasche nach dem Öffnen muss so schnell wie möglich für die Aufteilung oder Impfung durchgeführt werden, wenn sie vorübergehend nicht verwendet wird, muss die Flaschenmünde mit einer sterilen Abdichtungsfilm verpackt werden, in einem 4 ° C-Kühlschrank gekühlt werden, die Kühlzeit nicht länger als 24 Stunden ist, bevor die Flaschenmünde erneut verwendet wird, müssen die Desinfektionsschritte wiederholt werden.
Der Abschluss der Operation ist genauso wichtig wie die Ausnahmebehandlung. Nach dem GebrauchBasisflaschen kultivierenWenn das überschüssige Kulturmedium enthalten ist, muss das chlorierte Desinfektionsmittel hinzugefügt und sterilisiert werden; Wenn die nicht geöffnete Kulturflasche während des Betriebs versehentlich umgekehrt wird, müssen die kontaminierten Bereiche mit desinfizierter Baumwolle bedeckt und nach dem Sprühen des Desinfektionsmittels 30 Minuten gelassen und dann gereinigt werden. Gleichzeitig erstellen Sie einen Betriebsprotokoll, der die Öffnungszeit, den Benutzer und den Mediumstatus kennzeichnet, um eine Grundlage für die Rückverfolgung des Experiments zu bieten.
Das "richtige Öffnen" der Kultivbasisflasche ist kein einfaches physisches Öffnen, sondern die konkretisierte Operation der sterilen Philosophie. Von der Umweltdesinfektion bis zum Schutz der Flaschenmünde ist jedes Detail eine wichtige Verteidigungslinie, um die Genauigkeit und Sicherheit des Experiments zu gewährleisten, insbesondere in den Bereichen der Zelltherapie, der mikrobiologischen Pharmazeutik und anderen hochpräzisen Bereichen ist ein standardisierter Öffnungsprozess die Grundvoraussetzung für zuverlässige Experimentergebnisse.
