I. Hintergrundvorstellung

Die Darmmikrobe ist riesig und komplex, die Zusammensetzung und physiologische Veränderungen der Darmmikrobe des Körpers sind mit einer Vielzahl von Krankheiten verbunden, durch die Studie der Darmmikrobe können ihre Beziehung zu der menschlichen Gesundheit besser verstehen, derzeit ist die Trennung und Kultivierung der Darmmikrobe für diese Studie von entscheidender Bedeutung.

Traditionelle Darmflora-Isolierungskultur ist vor allem im Plattenmuster, aufgrund der hohen Arbeitslast hat das Plattenmuster zeitaufwendige, ineffiziente Probleme und oft schlechte Kultivierungswirkungen.MikrofluidisierungstechnologieDie Anwendung in der Darmflora-Isolationskultur wird zunehmend berichtet, indem die Darmflora in einzelne unabhängige Tropfen verteilt wird, um einen geschlossenen unabhängigen Flüssigkeitsgrenzraum für das Wachstum einzelner Bakterien bereitzustellen, um das Wachstum von Mikroorganismen erheblich zu fördern, um zu vermeiden, dass gefährdete Stämme von Stämmen mit Wachstumsvorteilen bedeckt werden, was die Art und Anzahl der kultivierbaren Mikroorganismen erhöht.

Dieses Experiment erstellt vollautomatisch Zehntausende unabhängiger Tropfenkultureinheiten mit dem MISS-Zellinstrument von Tianmi Bio, streut Mikroben auf einzelne Tropfen und kultiviert sie unabhängig, so dass verschiedene Arten von Bakterien in den Tropfen vollständig wachsen und sich vermehren können, während die Auswirkungen des übermäßigen Wachstums und der schnell wachsenden Population in der Gemeinschaftskultur beseitigt werden.MISS-Zell-Geräte basierende Kultivierungsmethoden überwinden die Mängel der herkömmlichen Plattenkulturmethoden erheblich und bieten eine wichtige Forschungsplattform für die Identifizierung und Entdeckung der seltenen Klassen von Darmsymbiotiken und der anaeroben Umweltflora.

Experimentelle Kultivierungsprozesse zur Isolierung von Darmflora auf Basis von Tabletten und MISS-Zell-Geräten

1. Vorbehandlung der Probe, Bestimmung der Konzentration an Bord

Nach der Entsammlung der Stuhlprobe verdünnen Sie die Blutzählplatte und verdünnen Sie die Probenkonzentration auf 10.000-30.000 CFU / mL mit einem Medium. Der Arbeitsablauf ist wie folgt:

2. Isolierung der Darmflora in anaeroben Umgebungen durch MISS-Zell-Geräte

Dieses Experiment generierte insgesamt etwa 20.000 Tropfen, nach 37 ° C 30 Tage anaerobe Kultur nach der Detektion und Sortierung, nach 5 Stunden Sortierung, erhielt insgesamt etwa 4.600 bakterielle Tropfen und eine hohe Durchflusssequenzierung, Arbeitsablauf wie in der folgenden Abbildung gezeigt:

3. Darmflora mit Flachplatte Isolationskultur

Dieses Experiment beschichtet insgesamt 15 Tabletten, nach 37 ° C 30 Tage anaerobe Kultur gesammelt und durchgeführt hohen Durchfluss Sequenzierung, Arbeitsablauf wie in der folgenden Abbildung gezeigt:

4. Experimentergebnisse

(1) Im Vergleich zu den nicht kultivierten Protogen von Fecal, mit MISS-Zell-Ausrüstung Isolierung der Kultur, identifizierte 10,9% (13/119) mehr Bakterien-Arten (Genus-Ebene), signifikant besser als 0,8% (1/119) von Tabletten.

(2) die Tropfenkultur ist um 40% höher als die Flachplattenkultur (Gattungsniveau), für die Gattung Bifidobacterium, Peptoniphilus, Collinsella, Phascolarctobacterium, Enterococcus, Porphyromonas etc. hat eine bessere Anreicherungseffekt.

TIANGUI Bio MISS Cell Instrumente bieten eine leistungsstarke und effiziente automatisierte Lösung für die Trennung, Kultivierung und Screening strenger anaerober Bakterien wie Darmflora

In dieser Studie verwendet Tianmi Bio MISS-Zellinstrument, generiert insgesamt 20.000 Tropfen, Sortierung erhielt Monoklon-Tropfen etwa 4.600, um die automatisierte Kultivierung und Sortierung der Darmflora zu erreichen, während, basierend auf den Vorteilen der Tropfenkultur, das Wettbewerbswachstum zwischen den Stämmen und die Kreuzkontamination vermieden wurde, um den Bakterienrichtum nach der Kultur erheblich zu verbessern.

MISS cell hat den gesamten Prozess des Darmfloraexperiments mit hohem Durchsatz und automatisiertem Betrieb erreicht, die Mikrobielkulturkapazität erheblich verbessert, die Arbeitslast des Experimentalpersonals erheblich reduziert und die Arbeitsproduktivität verbessert, die strenge Anaerobie, einschließlich der Darmflora, bietet eine effiziente automatisierte experimentelle Plattform für die Monoklonkultur und das Screening mit hohem Durchsatz, die starke Unterstützung für die Kultivierung und das Screening von Stämmen bietet!