Das Zellumgebungssystem kann hochauflösende Bilder erfassen, um die Mikrostruktur und die dynamischen Prozesse der Zelle klar zu zeigen. Dies ist wichtig für die Untersuchung der internen Mechanismen der Zellen, der Entwicklung von Erkrankungen und der Wirkung von Medikamenten. Die detaillierten und genauen Bilddaten, die das System liefert, ermöglichen es den Forschern, Beobachtungen und Vergleiche zu verschiedenen Zeitpunkten und Bedingungen durchzuführen, um die Konsistenz und Zuverlässigkeit der Experimente zu gewährleisten. Darüber hinaus können diese Daten auch für statistische Analysen verwendet werden, um potenzielle biologische Gesetze und Mechanismen aufzudecken, die die wissenschaftliche Forschung stark unterstützen.
Es hat einen breiten Anwendungswert in verschiedenen Bereichen wie Medikamentenentwicklung, Krebsforschung und Entwicklungsbiologie. Es hilft Forschern, die Interaktionen zwischen Zellen und der Mikroumgebung zu verstehen, die Mechanismen der Entstehung von Krankheiten zu erforschen und die Wirksamkeit von Medikamenten zu bewerten, um den Prozess der Forschung und Entwicklung neuer Medikamente zu beschleunigen und den Fortschritt in den Lebenswissenschaften zu fördern. Die automatisierte Steuerung des Systems reduziert den Bedarf an menschlichem Eingriff und reduziert die Bedienungsschwierigkeit und die Fehlerrate. Gleichzeitig erhöhen die effizienten Datenverarbeitungs- und Analysefähigkeiten die Forschungseffizienz erheblich und ermöglichen es Forschern, wertvolle Forschungsergebnisse schneller zu erzielen.
Schritte zur Bestimmung des Zellumgebungssystems:
1. Experimentale Konstruktion: Bei der Konstruktion von lebenden Zellbildgebungsexperimentellen Programmen müssen verschiedene Faktoren berücksichtigt werden, wie z. B. die zu beobachtenden Zellprozesse, die verwendeten Markierungsmethoden usw. Denn die Bildgebung von lebenden Zellen hat viele Vorteile, darunter die Möglichkeit, die Entstehung dynamischer Zellprozesse zu beobachten, mehrere Aspekte gleichzeitig mit der Mehrfarbendetektion zu untersuchen, die Struktur in der primären Zellumgebung zu untersuchen, um realistischere Ergebnisse zu erzielen, die Verfolgung von Biomolekülen und Strukturen im Laufe der Zeit und die Beobachtung von Interaktionen zwischen Zellen. Aber es ist auch wichtig, einige Probleme zu beachten, wie zum Beispiel eine spezifische niedrigtoxische Methode zur Kennzeichnung von Forschungszielen, da lebende Zellen für bestimmte große Testmoleküle nicht durchdringlich sind, ist es schwierig, sich auf das bewegliche Ziel zu konzentrieren, und zu berücksichtigen, ob die verwendete Technik für die Zellen schädlich ist, und sicherzustellen, dass die Zellen in einem natürlichen physiologischen Zustand sind.
Zellkultur: Es ist wichtig, Zellen unter optimalen Bedingungen zu erhalten oder zu kultivieren. Für Experimente mit Verzögerungsbildgebung und langfristiger Exposition der Umgebung ist die Auswahl des Mediums besonders entscheidend. Gewährleisten Sie die Gesundheit der Zellen und stellen sie so nah wie möglich an der physiologischen Temperatur, dem pH-Wert, dem Sauerstoffgehalt und anderen Bedingungen, um zuverlässige Ergebnisse zu erzielen.
3. Zell-Markierung: Verwenden Sie spezifische Farbstoffe und fluoreszierende Markierungsmittel, um Zellstruktur, Funktion und Zielproteine zu markieren. Geeignete fluoreszierende Farbstoffe wie spezifisch gezielte fluoreszierende Proteine oder kleine membrandurchlässige Reagenzien sollten ausgewählt werden. Wenn Sie mehrere Strukturen und Prozesse gleichzeitig erkennen möchten, können Sie mit anderen fluoreszierenden Farbstoffen kombiniert werden, aber mit dem Fluorescence SpectraViewer können Sie das Inspirations- und Emissionsspektrum prüfen, um eine spektrale Überlappung zwischen verschiedenen Farbstoffen zu minimieren. Gleichzeitig sollte die übermäßige Verwendung von Fluoreszenzmarkern vermieden werden, um Probleme wie unspezifische Färbung, Verstärkung des Hintergrundsignals, physiologische Falsifikation, strukturelle Störungen, Zytotoxizität und schwere Spektrumsüberlappungen zu verhindern.
Signaloptimierung: Versuchen Sie, Hintergrundstörungen zu minimieren und die Lichtstabilität des Fluoreszenzsignals aufrechtzuerhalten. Um das Signal-Rausch-Verhältnis zu verbessern, können Reagenzien verwendet werden, die die extrazelluläre Fluoreszenz reduzieren und die Lichtstabilität der Fluoreszenzfarbstoffe verbessern. Die Wahl eines Hintergrundinhibitors, der für lebende Zellen geeignet ist, hilft, die extrazelluläre Hintergrundfluoreszenz zu reduzieren, ohne zusätzliche Reinigungsschritte; Die Proben können auch mit lebenden Zellen-Antiquenchmitteln behandelt werden, um den Signalverlust durch mehrfache oder längere Expositionen zu verhindern.
5. Bildbeobachtung: Für die Bildgebung lebender Zellen von dynamischen Prozessen ist eine Langzeitbeobachtung erforderlich. Dabei müssen die Licht- und Erkennungsbedingungen vernünftig kontrolliert werden, um sicherzustellen, dass qualitativ hochwertige Bilddaten erhalten werden.
6. Startbetrieb: Schalten Sie zuerst den Zellkultursystem-Controller-Schalter, den offenen Feldschalter, den Quecksilberlampen-Schalter und den Mikroskopschalter ein; Anschließend wird der CO2-Schalter eingeschaltet, um den CO2-Druck unter 0,1 Mpa zu halten; Dann fügen Sie eine angemessene Menge an Hochdruckwasser in das Zellkultursystem hinzu und legen Sie die Zellen in; Anschließend öffnen Sie die Software zur Steuerung des Bildsystems, damit die CCD vorgekühlt wird; Suchen Sie unter dem Spiegel nach dem richtigen Sichtfeld und stellen Sie die entsprechenden Parameter fest, um lebende Zellen zu bilden.
7. Maschinenbetrieb: Schalten Sie zuerst die Software für die Steuerung des Bildsystems aus; Abschalten Sie erneut den Schalter für Kohlendioxid-, Lichtfeld-, Quecksilberlampen und Kultivierungssysteme; Anschließend schließen Sie das Mikroskop; Schalten Sie alle Stromversorgung aus; Entfernen Sie die Zellen und reinigen Sie das Kultursystem.