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Einführung in den Workflow des Laser-Kofokussmikroskops
Datum:2025-12-21Lesen Sie:2
Laser-KofokussmikroskopEs ist eine optische Mikrobildtechnik mit hoher Auflösung, die auf dem Prinzip des Laserscannens und der konjugierten Fokussierung basiert. Durch die Beseitigung von nicht-fokussierten Lichtstörungen wird eine zweidimensionale und dreidimensionale Bildgebung mit einer subzellulären Auflösung erreicht, die in den Bereichen Biomedizin und Materialwissenschaften weit verbreitet ist.

Der Arbeitsablauf ist wie folgt:

Laserfokussierung: Ein einfarbiger Laserstrahl wird auf eine bestimmte Fokusebene der Probe fokussiert und die Fluoreszenzsonde zur Fluoreszenz anregt.

Nadellöcher-Screening: Nur das Fluoreszenzsignal auf der Fokusebene kann durch das Nadellöcher vor dem Detektor passieren, und das gestreute Licht aus der nicht-Fokusebene wird durch das Nadellöcher blockiert, um einen höheren Bildkontrast zu erzielen.

Scan-Bildgebung: Der Laserstrahl scannt die gesamte Fokusebene Punkt für Punkt, Linie für Linie, der Computer sammelt Signale und rekonstruiert 2D-Bilder. Durch Bewegung der Probe entlang der Z-Achse erhalten Sie eine Reihe von Schnitten in unterschiedlichen Tiefen und können dann ein dreidimensionales Stereobild der Probe rekonstruiert werden.

Laser-KofokussmikroskopHauptmerkmale:

Hohe Auflösung und Kontrast: Effektiv ausgeschlossen Nicht-Fokusebene Störungen, horizontale Auflösung von bis zu 120-200 nm, Bildqualität weit über die herkömmliche Breitfeld-Fluoreszenzmikroskop.

3D-Stereobildgebung: Eine Probe kann ohne physische Schnitte „optisch“ geschnitten werden und eine dreidimensionale Struktur durch Software rekonstruiert werden, um die räumliche Form der Probe klar zu zeigen.

Mehrfarbige fluoreszierende Bildgebung: Laser mit mehreren Wellenlängen können ausgerüstet werden, während verschiedene fluoreszierende Sonden in der Probe angeregt werden, um verschiedene Zielstrukturen auf demselben Bild zu unterscheiden.

Dynamische Beobachtung lebender Zellen: Kleine Schäden an der Probe können in einer Umgebung wie Temperatur- und Feuchtigkeitskontrolle die dynamischen physiologischen Prozesse in lebenden Zellen in Echtzeit verfolgen.

Leistungsfähige Analysefähigkeiten: Die unterstützende Software ermöglicht eine Vielzahl von Datenverarbeitungen wie Bildverbesserungen, Zellzählungen, Fluoreszenz-Intensitätsquantifikationen und Co-Positionierungsanalysen.

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