Vorbereitung der Ausrüstung: Überprüfen Sie, ob die Verbindung zur Stromversorgung des CO2-Schaukelbettens und der Gasquelle (CO2-Stahlflasche) normal ist, um sicherzustellen, dass der Druck des CO2-Reduktionsventils stabil ist (in der Regel 0,1 bis 0,2 MPa). Schalten Sie das Gerät an, erwärmen Sie es auf die eingestellte Temperatur (z. B. 37 °C) und erwärmen Sie die Wasserplatte in der Küche, um die Feuchtigkeit aufrechtzuerhalten.

Parametereinstellung: Einstellung der CO2-Konzentration (in der Regel 5%) entsprechend den Bedürfnissen der Zelle, Kalibrierung durch Infrarot- oder Wärmeleitsensoren; Der Temperaturbereich wird in der Regel auf Raumtemperatur bis 50 ° C eingestellt, um Temperaturschwankungen vorzubereiten; Anpassung der Drehzahl (50 ~ 300 U/min) und der Amplitude (in der Regel 5 ~ 50 mm) entsprechend dem Kulturbehälter, um das Spritzen von Flüssigkeiten zu vermeiden; Wasserscheiben steriles destilliertes Wasser hinzufügen, um ≥95% Feuchtigkeit aufrechtzuerhalten.

Probenplatzierung: Der Behälter muss versiegelt werden (z. B. mit einer atmungsaktiven Abdeckfolie oder mit einer Flaschenabdeckung), um CO₂-Flucht und Verschmutzung zu verhindern; Gleichgewichtige Positionierung der Proben, um Schwerpunktverschiebungen zu vermeiden, die den Schaukelbett-Betrieb beeinflussen.

Betriebsüberwachung: regelmäßige Überprüfung der CO2-Konzentration und der Stabilität der Temperatur und Aufzeichnung der Betriebsparameter; Bei der Verwendung von Luftabdeckungs- oder Dichtflaschen muss die CO2-Permeabilität ausgewogen werden.

Beenden Sie den Betrieb: Schalten Sie die CO2-Quelle aus und schalten Sie die Maschine ab, bis die Konzentration auf 0% gesenkt ist, um Schäden an den Sensoren zu vermeiden; Reinigen Sie Wasserschalen und Hohlräume, um die Vermehrung von Mikroben zu verhindern.

Leitfaden für die beste Praxis der Zellkultur

Zelltyp und Mediumwahl: Wählen Sie je nach Zelltyp das geeignete Medium aus, wie DMEM für schnell vermehrte Zelllinien geeignet ist und MEM für eine Vielzahl von Zelltypen geeignet ist; Die ursprünglichen Zellen benötigen spezielle Wachstumsfaktoren.

Zellresultation und Einfrieren: Schnelle Auflösung von Zellen bei der Erholung, um Eiskristallschäden zu reduzieren; Gefrierschützmittel (z. B. 10% DMSO) hinzugefügt und langsam auf -80 ° C abgekühlt und auf flüssigen Stickstoff übertragen.

Sterile Operation: Alle Operationen werden auf einem ultrareinen Arbeitstisch durchgeführt, mit experimenteller Kleidung, Handschuhen, Masken und Mützen; Vermeiden Sie das Sprechen und Husten im Betriebsbereich, um das Risiko der Übertragung von Mikroben durch die Luft zu verringern.

Regelmäßige Beobachtung und Aufzeichnung: regelmäßige Beobachtung des Zellwachstums unter dem Mikroskop, einschließlich der Zellmormologie, der Wachstumsdichte und der Entstehung von Verschmutzungen; Die entsprechenden Daten werden aufgezeichnet, um Anomalien rechtzeitig zu erkennen und zu behandeln.

Wartung und Kalibrierung der Anlage: regelmäßige Kalibrierung des CO2-Sensors (alle 6 Monate) und Ersatz der Filterfolie (falls vorhanden); Stromausfall während der Reinigung, um Flüssigkeiten in das Schaltungssystem zu vermeiden.