Diese Anwendungsbeschreibung beschreibt die Entsalzung und Charakterisierung von monoklonalen Antikörpern (mAb) mit Entsalzungssäulen in der zweiten Dimension und 2D-LC/MS-Konfigurationen. Bei der dimensionalen Trennung wurden Ionenaustausch (IEX) und Affinitäts-Chromatografie (hauptsächlich salzbasierte Entfernungsbedingungen) verwendet. In der zweiten Dimension wird das Destillat vor der Massenspektrometrie mit einer Agilent AdvanceBio-Entsalzungsspalte entsalzt. Die Ergebnisse zeigen, dass die Entsalzungssäulen eine hervorragende Leistung bieten und qualitativ hochwertige Massenspektrumdaten liefern

Therapeutische Medikamente mit monoklonalen Antikörpern (mAb) sind ein sich ständig entwickelnder Bereich in der pharmazeutischen Industrie. Die Eigenschaften dieser Moleküle sind komplex und unterliegen verschiedenen enzymatischen oder chemischen Veränderungen während der Entwicklung und während des gesamten Lebenszyklus. Diese Modifikationen verursachen Heterogenitäten, einschließlich Spaltung, Posttranslationale Modifikation (PTM), Abbau, Aggregation und Sequenzwarianten. Daher müssen die Sicherheit, Qualität und Wirksamkeit der Produkte durch eine umfassende physiochemische Charakterisierung gewährleistet werden. Die Kombination von Multidimensionaler Flüssigchromatografie (2D-LC) und Massenspektrometrie (MS) ist eine gute Analysetechnik zur Charakterisierung verschiedener mAb-Isomere. Techniken wie Affinität, Ionenaustausch (IEX) und Volumenblockchromatografie (SEC) werden häufig für die Dimensionsentscheidung verwendet. Die typische Flussphase, die in diesen Flüssigchromatografietechniken verwendet wird, ist die Wasserphase und enthält nicht flüchtige Salze, die mit der Massenspektrometrie nicht kompatibel sind. Um diese durch Massenspektrum getrennten Chromatografikspitzen zu identifizieren, wurde eine Online-Entsalzungsmethode in der zweiten Dimension verwendet.

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