Im Bereich der Charakterisierung von Nanopartikeln,Partikelgröße、KonzentrationParameter wie PotenzialGenaue MessungEs ist ein Kernelement für den Erfolg der Forschung und Anwendung. Vorheriger Artikel haben wir detailliert geteilt「Häufige Parameter bei der Detektion von Nanopartikeln »Die genaue Erfassung dieser Parameter hilft nicht nur zur detaillierten Analyse der physikalischen und chemischen Eigenschaften von Nanomaterialien, sondernBiomedizin, Materialwissenschaften, UmweltwissenschaftenDie praktische Anwendung in diesen Bereichen bietet eine entscheidende Grundlage. DochGenauigkeit, Zuverlässigkeit, Wiederholbarkeit und Reproduzierbarkeit der MessdatenEs reicht nicht aus, sich allein auf fortschrittliche Geräte zu verlassen, sondern es ist auch erforderlich, die Leistung und den Betrieb der Geräte durch einen strengen Verifizierungsprozess zu gewährleisten. Das ist...3QZertifizierung (IQ, OQ und PQ)Wichtigkeit bei der Charakterisierung von Nanopartikeln.

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3Q ZertifizierungInhalt und Bedeutung

3Q-Zertifizierung: Installationsbestätigung (IQ), Betriebsbestätigung (OQ) und Leistungsbestätigung (PQ)Es handelt sich um einen internationalen Verifizierungsprozess, der darauf abzielt, dieInstallationskonformität, Betriebsstabilität und Zuverlässigkeit der MessleistungDer Prozess ist in den GMP (Pharmaceutical Production Quality Management Practice) festgelegt und wird in vielen Bereichen wie Pharma, Medizingeräte und Materialwissenschaften weit verbreitet.^[1]Die 3Q-Zertifizierung bietet einen standardisierten Rahmen für den Einsatz und die Wartung von Geräten in biomedizinischen Bereichen, um sicherzustellen, dass Geräte konsistent präzise und zuverlässige Daten über Installation, Betrieb und praktische Anwendungen liefern.^[2].

Im Bereich der Charakterisierung von Nanopartikeln,Die 3Q-Zertifizierung regelt nicht nur die Installation und den Betrieb der Geräte, sondern gewährleistet auch die Wissenschaft und Wiederholbarkeit der Daten durch einen systematischen Validierungsprozess.Dieser Artikel wird im Detail erläutert.Kerninhalte der 3Q-Zertifizierung und deren konkrete Umsetzung in der Charakterisierung von NanopartikelnInhaltEs wird untersucht, wie die Zuverlässigkeit der Instrumente durch strenge Validierungssysteme verbessert und die qualitativ hochwertige Entwicklung von Nanowissenschaften und industriellen Anwendungen unterstützt werden kann.

Installationsbestätigung (IQ)

IQ ist ein Prozess zur systematischen Prüfung und Validierung des Installationsprozesses eines Nanopartikel-Charakterisierungsinstruments.Ziel ist es, sicherzustellen, dass die Installation des Instruments den Konstruktionsnormen des Herstellers und den Anforderungen des Benutzers entspricht. Dazu gehören die Dokumentenprüfung, die Bestätigung der Installationsumgebung und die Bestätigung von Geräteteilen.

• DokumentenprüfungÜberprüfen Sie, ob das Installationshandbuch, das Benutzerhandbuch, das Wartungshandbuch und andere Dokumente vollständig sind. Überprüfen Sie die grundlegenden Informationen wie den Namen, das Modell und die Seriennummer des Geräts, um sicherzustellen, dass es mit der Einkaufsliste übereinstimmt. Stellen Sie sicher, dass die Installationsumgebung des Instruments den Entwurfsanforderungen einschließlich Temperatur, Feuchtigkeit, Stromversorgung usw. entspricht.
• Bestätigung der InstallationsumgebungStellen Sie sicher, dass die Umgebungsbedingungen am Installationsort (z. B. Abluftung, Temperatur- und Feuchtigkeitskontrolle, Stromversorgung usw.) den Betriebsanforderungen des Geräts entsprechen. Überprüfen Sie, ob die elektrische Sicherheit, die Maschinensicherheit und die Umweltsicherheit der Geräte den einschlägigen Normen entsprechen.
• Bestätigung der GeräteteileÜberprüfen Sie, ob die einzelnen Komponenten des Instruments richtig installiert und die Verbindung fest ist. Stellen Sie sicher, dass die Kalibrierung und Inbetriebnahme des Instruments abgeschlossen sind und alle Funktionen in Ordnung sind.

Durch IQ sind die grundlegenden Schritte, um sicherzustellen, dass das Gerät nach den Konstruktionsnormen korrekt installiert ist, Voraussetzungen für die nachfolgenden Betriebs- und Leistungsbestätigungen.

Betriebsbestätigung (Operational Qualification, OQ)

OQ ist der Prozess, bei dem nach Abschluss des IQ überprüft wird, ob Geräte und Instrumente innerhalb des vorgeschriebenen Betriebsbereichs (in der Regel unter leeren oder analogen Betriebsbedingungen) funktionieren und sichergestellt wird, dass ihre Funktions- und Leistungsparameter den vom Hersteller vorgegebenen technischen Indikatoren entsprechen.Das Kernziel von OQ besteht darin, zu überprüfen, ob die Funktionen des Instruments die Konstruktionsanforderungen erfüllen und ihre Stabilität und Konsistenz unter Standardbetriebsbedingungen zu überprüfen.

Allerdings kann die zuverlässige Messung des Instruments unter realen Versuchsbedingungen nicht durch OQ allein gewährleistet werden, was die Notwendigkeit von PQ hervorruft.

Leistungsbestätigung (Performance Qualification, PQ)

Nach erfolgreichem Abschluss der OQ wurde das Instrument als stabil in den vorgeschriebenen Betriebsbereichen eingestuft und in der Lage, Messaufgaben durchzuführen. undPQ ist ein Prozess, bei dem überprüft wird, ob ein Gerät die gewünschte Leistung unter den tatsächlichen Nutzungsbedingungen erreichen kann, um sicherzustellen, dass das Gerät unter den tatsächlichen Versuchsbedingungen und Prozessabläufen kontinuierlich und stabil genaue Messergebnisse liefert.

In der täglichen Validierungsarbeit können OQ und PQ oft leicht verwechselt werden. Um den Vergleich zu erleichtern, verwenden wir die folgenden Tabellen, um die Unterschiede zwischen den beiden einzeln zusammenzufassen.

Aus der obigen Tabelle ist es nicht schwer zu verstehen, dass das Hauptziel von PQ darin besteht, die Leistung der Geräte unter den tatsächlichen Produktionsbedingungen zu testen, um sicherzustellen, dass die Geräte die festgelegten Leistungsstandards stabil erfüllen und die Anforderungen der Produktproduktion erfüllen können. Die PQ-Zertifizierung ist ein wichtiger Schritt im Prozess der Verifizierung von Geräten, dessen Wichtigkeit sich in den folgenden Aspekten widerspiegelt: 1. Reduzierung des Risikos: Durch PQ wird sichergestellt, dass Geräte in praktischen Anwendungen sicher und zuverlässig funktionieren und Qualitätsrisiken reduziert werden; Konformität: Einhaltung internationaler Vorschriften und Industriestandards wie GMP (Qualitätsmanagementspezifikationen für die Herstellung von Arzneimitteln), ISO 13485 usw., um die Konformität des Unternehmens zu verbessern; Verbesserung der Qualität: Überprüfen Sie die Funktion und Leistung der Ausrüstung, um sicherzustellen, dass der Produktionsprozess den erwarteten Anforderungen entspricht und somit die Produktqualität verbessert.Bei Geräten können IQ und OQ in der Regel von Gerätelieferanten in Form von Produktdienstleistungen bereitgestellt werden, während PQ grundsätzlich von Gerätebenutzern oder Anwendungseinheiten mit realen Proben basierend auf dem tatsächlichen Prozessprozess durchgeführt werden muss.

Die Nanopartikel-Prüfgeräte gehören zu präzisen Messgeräten, und die Testdaten betreffen eine weitere Reihe wissenschaftlicher Forschungsarbeiten. Durch die strenge PQ-Zertifizierung kann die Prüffähigkeit des Instruments grundsätzlich bestimmt werden, was eine wichtige Richtlinie darstellt, wie die Testdaten des Instruments in Zukunft korrekt betrachtet werden können. Welche Aspekte der experimentellen Validierung umfasst die PQ-Zertifizierung für präzise Charakterisierungsinstrumente? Als nächstes werden wir die wichtigsten Experimente in der PQ-Zertifizierung und ihre Auswirkungen auf die Datenqualität vertieft.

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BezüglichPQ VerifizierungSchlüsselparameter

Genauigkeit (Accuracy)

Im PQ,Genauigkeit istMessergebnisse des Instruments (Messwert)Mit echten Werten(Wahrvon vAlue)oder Referenzwerte(AkzeptiertrEferenzvon vAlue)der Nähe zwischen ihnen.Nach den neuesten »ICH Validierung von Analyseverfahren Q2(R)2) Definition der Analysemethode Validierungsleitlinie, die Genauigkeit spiegelt die Messmethode "in der Nähe des wahren Wertes", die Bewertung ist die Richtigkeit der Messergebnisse des Instruments, ist einer der zentralsten Indikatoren für die Bewertung der Leistung des Instruments.

Bei der Charakterisierung von Nanopartikeln wird die Genauigkeit in der Regel durchZertifiziertes Referenzmaterial (CRM) oder andere Methoden(z.B. Transmittionselektroskop TEM zur Erkennung der Partikelgröße) zum Vergleich zu bewerten. Mit anderen Worten, die Genauigkeit spiegelt wider, ob die Abweichung der erhaltenen Daten im akzeptablen Bereich liegt, wenn das Instrument Zielparameter wie Partikelgröße, Konzentration oder Zeta-Potential eines Nanopartikels bestimmt. Genauigkeit kann in analytischen chemischen und biomedizinischen Experimenten eingesetzt werdenWiederherstellungsrate (Recovery)Dieser Parameter wird bewertet. Es gibt den Anteil an Zielanalyten an, die während des Experiments erfolgreich aus der Probe gewonnen oder detektiert wurden. Die Berechnungsformel lautet:

Idealerweise sollte die Recyclingrate nahe 100% liegen, was bedeutet, dass die experimentelle Methode das Zielanalyte extrahieren oder detektieren kann. Die Abweichung von 100% spiegelt einen Systemfehler der experimentellen Methode wider. In praktischen Anwendungen wird der akzeptable Bereich der Recyclingquote in der Regel anhand der experimentellen Anforderungen und der Branchenstandards bestimmt. Beispielsweise ist in der Bioanalyse die Recyclingquote in der Regel zwischen 80% und 120% erforderlich.^[6].

Zusätzlich zu den oben genannten über CRM etc.Vergleich von Referenzmaterialien (Referenzmaterialvergleich)Neben der Methode wird auch die Genauigkeit bewertet.Spiking-Studie (Spiking-Studie)- eine bekannte Menge an Analysaten (d.h. Intramer, häufig CRM) künstlich zu einer Testprobe in einer Matrix hinzugefügt oder angereichert wird, die diese Substanz nicht enthält, und die Messungen mit einer zu prüfenden Analysemethode durchgeführt werden und die Abweichungen zwischen den Messergebnissen und der theoretischen Zusatzmenge (oder dem theoretischen Wert des Intramers) verglichen werden (wenn die Rückgewinnungsrate zu groß abweicht, kann dies darauf hindeuten, dass die Matrixbestandteile die Messung stören und eine Optimierung der Methode oder Korrektur des Matrixeffekts erforderlich sind); Oder durch die Bewertung der Prüfgenauigkeit (der Methode oder der Ausrüstung) der nicht markierten und der markierten/angereicherten Probe, um die nicht markierten Inhaltsstoffe in der Mischprobe zu beurteilen.

Darüber hinaus können Forscher auch verwenden, wenn nicht alle relevanten Komponenten für den Aufbau einer passenden Matrix für Markierungsexperimente verfügbar sind.Ortogonale Methode (OrthogonalVerfahren,Bedeutet die Verwendung einer unabhängigen Analysemethode, die sich vom Hauptverfahrensprinzip unterscheidet, zur Messung derselben Probe und zur Überprüfung der Zuverlässigkeit des Hauptverfahrens durch den Vergleich der Ergebnisse）Um die Genauigkeit der wichtigsten Messmethoden zu überprüfen.

Genauigkeit (Präzision)

Genauigkeit bezieht sich auf wiederholte Messungen unter den gleichen Versuchsbedingungen.Ein Datensatz in derselben ProbezwischenDiskretiertGrad, d.h. Konsistenz der Messergebnisse.Genauigkeit wird durch die Wiederholbarkeit und Reproduzierbarkeit der Methode gemessen, nicht durch die Genauigkeit der Daten. Nehmen Sie zum Beispiel das Schießen auf das Ziel (Abbildung unten): Je höher die Genauigkeit, desto weniger die Volatilität der Beschreibungsmethode, desto stabiler sind die Messergebnisse, aber nicht unbedingt genau (in der Nähe des Zielzentrums); Ebenso sind Daten mit hoher Genauigkeit nicht unbedingt stabil und die Reproduzierbarkeit der Erkennungsdaten ist nicht unbedingt hoch. Genauigkeit und Präzision können unabhängig oder in Kombination bewertet werden, wobei jeweils vorgegebene Akzeptanzkriterien erforderlich sind.

Nach ICH Q2(R2) kann die Präzision in drei Kategorien unterteilt werden:

• Wiederholbarkeit(Wiederholbarkeit)Genauigkeit der Messungen, die innerhalb kurzer Zeit im gleichen Labor, unter denselben Bedingungen, mit demselben Bediener, mit demselben Gerät durchgeführt werden. Zum Beispiel bei der Detektion der Partikelkonzentration wird empfohlen, a) mindestens neun Tests einzustellen, d. h. drei verschiedene Konzentrationen, die jeweils dreimal wiederholt werden; Oder b) den Test mindestens sechsmal wiederholen, um die Wiederholbarkeit zu bewerten.
• Mittelpräzision (Intermediate Precision)Genauigkeit der Messungen, die im gleichen Labor, aber unter unterschiedlichen Bedienern, zu unterschiedlichen Zeiten oder unter unterschiedlichen Gerätebedingungen durchgeführt werden. Der spezifische Umfang des Validierungsexperiments muss von den Validierern anhand der tatsächlichen Anwendungsszenarien bestimmt werden. Mit anderen Worten, nicht in allen Fällen muss jede Variable einzeln getestet werden, und nicht unbedingt müssen alle Variablen vollständig getestet werden, sondern zufällige Faktoren, die die Messgenauigkeit beeinflussen können, basierend auf den tatsächlichen Bedürfnissen bewertet werden und das experimentelle Design basierend auf der Produktionsentwicklung und der Risikobewertung validiert werden. Abhängig von den unterschiedlichen Bewertungsfaktoren und dem experimentellen Design umfasst die mittlere Präzision auch die Tagesgenauigkeit (unterschiedliche Testdaten), die Raumpräzision (unterschiedliche Umgebungsbedingungen: Temperaturänderungen, Vibrationen, Luftströme usw.), die Präzision des Personals (verschiedene Bediener), die Präzision zwischen Geräten (verschiedene Instrumente oder verschiedene Chargen von Instrumenten), die Präzision zwischen Chargen / Chargen (Proben zwischen Chargen oder innerhalb derselben Charge) usw.
• Reproduzierbarkeit (Reproducibility)Die Präzision der Ergebnisse wird in unterschiedlichen Laboren oder in unterschiedlichen Umgebungen von verschiedenen Personen mit der gleichen Methode gemessen. In den meisten Fällen verpflichten Regulierungsbehörden wie die FDA oder die EMA die Einreichung von Daten für Reproduzierbarkeitstests in der Regel nicht, aber solche Tests müssen in Erwägung gezogen werden, wenn: a) eine standardisierte Analysemethode (z. B. eine bestimmte Testmethode in die Pharmakopädie aufzunehmen). b) gemeinsame Verwendung mehrerer Labore (z. B. wenn alle regionalen oder institutionsübergreifenden Labore dieselbe Methode verwenden).

Bei der Charakterisierung von Nanopartikeln ist die Präzision ebenfalls einer der grundlegenden Indikatoren für die Bewertung der Geräteleistung. Hochpräzise Instrumente sind von entscheidender Bedeutung, um die Zuverlässigkeit der experimentellen Daten zu gewährleisten. Zum Beispiel bei der Präzisionsprüfung der Partikelgröße wird die Präzision eines Instruments in der Regel durch mehrmalige Messungen derselben CRM-Standardprobe (z. B. nachverfolgbarer Nanopartikelgröße-Standardmikrokugel) und Berechnung der Standardabweichung (SD) oder des Variationskoeffizienten (CV-Wert) des Messergebnisses beurteilt.

Variationskoeffizient (CV)ist ein statistischer Indikator, um die Diskretion der Daten zu messen,Verhältnis der Standardabweichung zum Durchschnittswert, die als Daten dargestellt wird(daher manchmal auch als relative Standardabweichung (RSD) bezeichnet) können Sie die Stabilität verschiedener Instrumente oder unter verschiedenen Messbedingungen intuitiv vergleichen. Es ist ein messloser Indikator, der in der Regel in Prozent ausgedrückt wird. Je kleiner der CV-Wert ist, desto geringer ist die Diskretion, was bedeutet, dass die Wiederholbarkeit und Stabilität der Messergebnisse besser und die Präzision höher ist. Die Berechnung des Variationskoeffizienten lautet:

wobei σ die Standardabweichung (SD) ist und μ der Mittelwert der Messdaten ist.

Messbereich (Range)

Der Testbereich bezeichnet den effektiven Bereich, in dem eine Analysemethode für die Probenprüfung geeignet ist, sofern Genauigkeit, Genauigkeit und Linearität gewährleistet sind.

Detektionsgrenze (LOD) und Quantifizierungsgrenze (LOQ)

• LOD:Analysemethoden oder -instrumente können die vorhandenen Messwerte (Partikelgröße, Konzentration, Potential usw.) zuverlässig erkennen, ohne dass das Signal genau quantifiziert werden muss. LOD steht für die untere Empfindlichkeitsgrenze der Detektionsmethode und ist für die Spuranalyse entscheidend.

• LOQ:Die Unterscheidungsgrenze des Analysats kann quantitativ gemessen werden. Analysemethoden oder -instrumente könnenZuverlässig und genauDie Messung des Ziels (Partikelgröße, Konzentration, Potential usw.) erfordert eine ausreichende Genauigkeit und Genauigkeit. Bei der LOQ-Einstellung muss ein CV% ≤ 10% (oder strengere Anforderungen) erfüllt werden.

Der frühere Artikel in dieser Nummer erläutert die Bedeutung und Wichtigkeit der Testbeschränkungen im Bereich der Partikelcharakterisierung im Bereich der Biopharmazeutik."Partikel charakterisieren LOD-Gesicht".

Linearitätsbereich (Linearity Range)

Linearität bezieht sich auf die Fähigkeit einer Analysemethode, eine lineare Beziehung zwischen dem Signal (Reaktionswert) und der Konzentration oder Menge des gemessenen Stoffes in einem bestimmten Konzentrationsbereich zu erkennen.Kurz gesagt, wenn sich die Probenkonzentration oder die Teilchenzahl innerhalb eines bestimmten Bereichs ändert, sollten sich die Messungen proportional ändern. Gute lineare Methoden haben einen hohen linearen Korrelationskoeffizienten (R).²(und R)²Je näher 1, desto besser die lineare Beziehung. Normalerweise ist ein Datensatz R²≥ 0,8 wird als relevanter betrachtet; Um die Zuverlässigkeit der Daten zu gewährleisten, ist R²≥ 0,99 (oder nach spezifischen Branchenstandards).

Linearitätsbereich (L)inearREgion(1) bezeichnet den größten Bereich, in dem das Testverfahren eine lineare Beziehung in einem bestimmten Konzentrations- oder Teilchenmengenbereich aufrechterhalt.Unterhalb der unteren Grenze des linearen Intervalls kann das Signal unter der LOD des Instruments liegen und nicht zuverlässig erkannt werden; Über der oberen Grenze des linearen Intervalls kann eine Signalsättigung auftreten, das Instrument nicht richtig reagiert oder nichtlineare Effekte auftreten. Während des PQ-Prozesses ist auch die Validierung des linearen Intervalls der Analysemethode oder des Instruments erforderlich, in der Regel mit den folgenden experimentellen Methoden:

• Kalibrierungskurvenmethode (Calibration Curve Method)：Mit Standardproben mit unterschiedlichen Konzentrationen oder unterschiedlichen Partikelmengen werden Standardkurven gezeichnet. Die spezifischen experimentellen Schritte sind wie folgt:

1. Vorbereiten Sie eine Reihe von Standardproben mit unterschiedlichen Konzentrationen, die Standardmikrosphären mit theoretischen Nennkonzentrationen oder andere praktische Proben mit bekannten Konzentrationen sein können. Unterschiedliche Konzentrationseinstellungen werden in der Regel durch kontinuierliche oder mehrfache Verdünnung der ursprünglichen Probe hergestellt. (ICH empfiehlt eine entsprechende Verteilung von mindestens fünf Konzentrationen im gesamten Bereich)^[2].)

2. Jede Probe wird mit der zu messenden Methode individuell gemessen und die Messsignale (wie Absorptionsgrad, Fluoreszenzintensität, Spitzenfläche usw.) oder die Messwerte (direkte Konzentrationszuordnung usw.) aufgezeichnet.

3. Zeichnet ein Streudiagramm der Messsignale/Messwerte (y) und der erwarteten Konzentration (x).

4. Anpassung einer geraden Linie durch lineare Regressionsanalyse, Berechnung der Neigung (k), des Abstands (b) und des Korrelationskoeffizienten (R)²).

5. gemäßR²Die linearen Intervalle werden durch die Recyclingrate-Validierungskriterien bestimmt, die in der Regel eine Abweichung von ±10% erfordern.

• Methode der linearen Regression (Linear Regression Method)：Wenn die Konzentration der Probe unbekannt ist,Mit der höchsten Konzentration der Originalflüssigkeit der Probe werden 4-5 Konzentrationsgradiente mit dem gleichen Puffersystem kontinuierlich verdünnt (oder von der Originalflüssigkeit mehrfach verdünnt) und die oben genannte Standardkurvenmethode umgesetzt.Der Unterschied besteht darin, dass die erwartete Konzentration auf die Gegenzahl des Verdünnungsfaktors der Probe des jeweiligen Konzentrationsgradients angepasst wird (1/N Verdünnungsfaktor).Zeichnen Sie eine lineare Regressionsanpassungslinie zwischen den Konzentrationsmesswerten (oder dem Konzentrationsdurchschnitt der Gradientenpunkte) und dem entsprechenden Verdünnungsverhältnis und bewertenR²(wie im folgenden Bild).Diese Methode ist eine der am häufigsten verwendeten Methoden bei der Analyse-Validierung.

Konzentrationslinearität von NIST-Standardmikrosphärischen Proben gemischt

• Die Spiked Recovery MethodeÄhnlich wie bei der GenauigkeitsprüfungMarkierungsexperiment,Die Analyseschritte sind wie folgt:

1. Zur Herstellung einer Reihe von markierten Proben werden Zielanalyten mit bekannten Konzentrationen in die leere Matrix hinzugefügt.

2. Messung der markierten Probe mit der zu messenden Methode, Aufzeichnung von Messsignalen oder direkten Messwerten und Berechnung der Recyclingrate.

3. Bestimmung des linearen Intervalls basierend auf der Rückgewinnungsrate (normalerweise 80%-120%) und den Ergebnissen der linearen Regressionsanalyse^[6].

Es ist bemerkenswert,Unterschied zwischen linearem Intervall und Erkennungsbereich：

Zum Beispiel kann ein Gerät eine Konzentration von 10 erkennen.⁶-10⁹particles/mL Nanopartikel (Erkennungsbereich), aber nur in 2 x 10⁸-8×10⁸ Eine strikte lineare Beziehung zwischen den Partikeln/mL (linearer Intervall) wird aufrechterhalten. Der lineare Intervall beginnt in der Regel mit dem LOQ und endet mit der höchsten Konzentration oder Partikelgröße, in der die Instrumenterantwort nicht mehr linear ist. In praktischen Anwendungen bestimmen Messgrenzen und lineare Intervalle gemeinsam den Messbereich und die Anwendbarkeit von Nanopartikelanalysegeräten. Die niedrigeren Detektionsgrenzen und der breitere lineare Intervall bedeuten, dass das Gerät zuverlässige Messergebnisse in einem breiteren Konzentrations- und Partikelgrößenbereich liefern kann.

Eigenschaften (Spezifikation/Selektivität)

Exklusivität, d. h. ob die Analysemethode bei der Bestimmung eines Ziels Störungen anderer Substanzen vermeiden kann, um das Ziel genau zu identifizieren oder zu quantifizieren.Die Eigenschaftsprüfung ist oft einer der ersten Bestätigungselemente, die bei der Validierung der Analysemethode berücksichtigt werden müssen, und es hängt davon ab, ob die geeignete Prüfmethode gewählt wurde. Nanopartikel Charakterisierung Robustheit Prüfung häufig verwendetMarkierungsexperimentMethoden zur Durchführung des Störungstests:

1. Eine bestimmte Menge an Proben oder Verunreinigungen, die nicht empfindlich für die aktuelle Methode sind, wie z. B. Proben, für die diese Methode nicht gilt, oder Störproben, die außerhalb des Nachweisbereichs liegen, in die zu prüfende Probenmatrix eingefügt werden. Überprüfen Sie, ob die Einbindung Auswirkungen auf das Testergebnis hat, indem Sie die Datenänderungen vor und nach der Einbindung der Störungsprobe vergleichen. Beispielsweise wird bei einem Gerät mit einem Messbereich von 50-200 nm eine Standardlösung von Mikrosphären oder Proteinpartikeln mit einer bekannten Partikelgröße (20-30 nm) in die zu messende Probe hinzugefügt, um die Partikelgröße und die Konzentration der Probe mit und ohne Zusatz zu erkennen, um zu bestimmen, ob das Gerät für die Charakterisierung solcher Proben geeignet ist.

2. Beim Hinzufügen einer bekannten Menge an die Probe wird bewertet, ob die Testreaktion der Geräte auf die Standardsubstanz den theoretischen Erwartungen entspricht und ob die Verteilungsmessungen nach der Mischung verschiedener Partikelgrößen genau sind. Zum Beispiel fügen Sie eine CRM-Mikrosphäre mit einer Partikelgröße von 150 nm in eine Exosomen-Probe (normalerweise in einem Partikelgrößenbereich von 30-150 nm) hinzu, um die Veränderungen in der Partikelgröße und -konzentration der Probe zu erkennen. Wenn ein entsprechendes inneres Markierungssignal detektiert werden kann, während der mittlere Partikelgrößenwert der markierten Mischung mit dem theoretischen Partikelgrößenwert übereinstimmt (die Rückgewinnungsrate liegt im Akzeptanzbereich) und der Konzentrationswert unverändert ist, kann die Prüfmethode für die Exosomenprobe bestimmt werden. Dieses Experiment eignet sich insbesondere für die Beurteilung der Erkennungsfähigkeit eines Instruments auf Proben aus polydispersen Systemen.

Darüber hinaus können eigenständige Experimente ebenfalls mit einer orthogonalen Methode verglichen werden (ein anderes, aber vollständig bewährtes Messprinzip). Wenn das Prinzip der Analysetechnik selbst eine hohe Spezifizität gewährleistet, ist keine zusätzliche experimentelle Validierung erforderlich, sondern nur eine vernünftige theoretische Unterstützung.^[2].

Robustheit(Robustheit)

Robustheit(auch als Haltbarkeit bezeichnet)Es bezieht sich auf Analysemethoden, die experimentelle Bedingungen in kleinem Umfang ändern(Temperatur, pH, Reagenzkonzentration usw.)Stabilität und Zuverlässigkeit der Messergebnisse erhalten.Es misst die Toleranz der Methode gegenüber leichten Umweltschwankungen. Darüber hinaus können Robustheitstests verwendet werden, um die Stabilität der Probenvorbereitung und der Reagenzien zu bewerten, um sicherzustellen, dass die Daten während des gesamten Experiments nicht durch Änderungen dieser Faktoren beeinflusst werden. Im Allgemeinen wird die „Störungsbeständigkeit“ der Prüfmethode im Voraus bewertet, um sicherzustellen, dass sie auch unter realen experimentellen Bedingungen (nicht idealen Bedingungen) funktioniert. Die Ergebnisse der Robustheitstests können während der Methodenentwicklungsphase als Referenzdaten vorgelegt werden oder auf Anfrage der Aufsichtsbehörde zur Verfügung gestellt werden.

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Schlussfolgerung

Diese Parameter und Experimente umfassen nicht nur die Anpassungsfähigkeit des Instruments unter verschiedenen Probenbedingungen, sondern auch Kernindikatoren wie Genauigkeit, Wiederholbarkeit und langfristige Stabilität der Daten. Nur durch diese strengen Verifikationen können wir sicherstellen, dass die Geräte eine standardisierte Messsicherheit und zuverlässige Datenunterstützung in praktischen Forschungs- und Produktionsumgebungen bieten und wissenschaftliche Grundlagen für die korrekte Interpretation der Testergebnisse bieten.

Referenzen:

Generaldirektorat für die staatliche Marktaufsicht. (2020). Qualitätsmanagement für die Herstellung von Arzneimitteln (GMP).

Internationaler Rat für die Harmonisierung der technischen Anforderungen für menschliche Arzneimittel (ICH). (2023). Validierung der Analyseverfahren Q2(R2).

Die US Food and Drug Administration (FDA). (2011). Prozessvalidierung: Allgemeine Grundsätze und Praktiken.

Internationaler Rat für die Harmonisierung der technischen Anforderungen für menschliche Arzneimittel (ICH). ICH Q7: Good Manufacturing Practice Guide für pharmazeutische Wirkstoffe 2016.

5.USP Allgemeines Kapitel <1058>: Qualifikation für analytische Instrumente[S]. United States Pharmacopeia, 2023.

Die US Food and Drug Administration (FDA). Bioanalytische Methode Validierung Leitlinie für Industrie[S]. 2018.

China Pharmacopoeia Edition 2020 - Leitlinien für die Validierung von Analysemethoden 9101