Vorbereitung vor der Regeneration
Ultraflüssige Chromatographie SäulenVorbereitung mit Reagenzien: Vorbereitung von chromatografischen Lösungsmitteln wie ultrareines Wasser, Methanol, Acenitril, Isopropanol und geeigneten Abfallflüssigkeitssammelflaschen; Stellen Sie sicher, dass der Flüssigkeitsspektrometer-Pumpenkörper und das Probenventil keine Leckagen haben.
Chromatografische Säulenprüfung: Aufzeichnung der aktuellen Säulenwirkung und Spitzenformdaten der Chromatografische Säulen vor der Regeneration, wenn es starke Rückstände von Schadstoffen in der Säulen gibt, muss zuerst bewertet werden, ob die Chromatografische Säulen einen Regenerationswert haben.
Sicherer Betrieb: Handschuhe und Schutzbrillen tragen, um den Kontakt mit organischen Lösungsmitteln mit der Haut zu vermeiden; Sicherstellung einer guten Belüftung im Labor.
II. Allgemeiner Regenerationsschritt (hauptsächlich Umkehrschromatografie)
Spülen Flussphase Reste
Entfernen Sie die Chromatografie-Säule und spülen Sie sie 30-60 Minuten lang mit ultrareinem Wasser mit einer niedrigen Durchflussgeschwindigkeit (0,2-0,3 mL/min), um wasserlösliche Verunreinigungen wie Puffersalz zu entfernen und zu verhindern, dass Salze aus verstopften Füllstoffen ausfallen.
Wenn das Ionenpaarmaterial in der Flussphase enthalten ist, ist es notwendig, 1-2 Stunden mit einer 50%igen Methanol-Wasserlösung zu spülen und dann auf reines Methanol zu wechseln.
Entfernung starker hydrophober Schadstoffe
Spülen Sie die Chromatografie-Säulen mit 100% Methanol und 100% Acenitril mit einer Durchflussgeschwindigkeit von 0,3-0,5 mL/min, wobei das Spülvolumen jedes Lösungsmittels das 20-30-fache des Säulenvolumens beträgt.
Wenn die Schadstoffe hartnäckig sind, können Sie mit Isopropanol spülen (beachten Sie die hohe Viskosität des Isopropanols, die Durchflussgeschwindigkeit muss reduziert werden, um einen zu hohen Säulendruck zu verhindern), nach dem Spülen mit Methanol übergang.
Reinigung polarer Schadstoffe
Für die chromatografischen Säulen, die polare Verunreinigungen enthalten, 60 Minuten mit einer Methanol-Wasser-Mischung (1:1) und anschließend mit reinem Methanol bis zur Gleichheit der Ausgangslinie spülen.
Gleichgewicht nach der Regeneration
Die chromatografische Säule wird mit der Flussphase der Zielanalyse ausgeglichen, wobei das Gleichgewichtsvolumen nicht weniger als das 10-fache des Säulenvolumens ist, bis die Probenanalyse nach der Stabilisierung der Basislinie erfolgt.
III. Besondere Typen von Chromatografie Säulen Regeneration Hinweise
Orthophase-Chromatografie-Säule: Spülen mit wasserhaltigen Lösungsmitteln ausgeschlossen, bei der Regeneration mit Orthoxan, Dichlormethan und Ethylessig gespült und schließlich mit Orthoxan im Gleichgewicht aufbewahrt.
Ionenaustauschchromatografie: Spülen Sie zuerst mit einer Pufferlösung, die dem pH-Wert entspricht, dann mit deionisiertem Wasser bis zur Neutralität und speichern Sie schließlich mit einem Puffer, der 5% Methanol enthält.
Handliche Chromatografie-Säulen: Vorzugsweise verwenden Sie das vom Hersteller empfohlene regenerierende Lösungsmittel, vermeiden Sie die Verwendung starker polarer Lösungsmittel und verhindern Sie die manuelle Fixierung der Phase.
Überprüfung und Aufbewahrung nach der Regeneration
Leistungsprüfung:Ultraflüssige Chromatographie SäulenNachdem die Regeneration abgeschlossen ist, wird die Injektion von Standardprodukten zur Prüfung der Säulenwirkung und der Spitzensymmetrie durchgeführt, wenn sich die Spitzenform verbessert und die Säulenwirkung auf mehr als 80% des ursprünglichen Niveaus zurückkehrt, was darauf hindeutet, dass die Regeneration erfolgreich ist.
Langfristige Aufbewahrung: Die Gegenphase-Chromatografie-Säule wird mit reinem Methanol versiegelt, die Phase-Chromatografie-Säule wird mit orthohexan gespeichert, die beiden Enden werden festgeschraubt und in einer normalen Temperatur- und Lichtschutzumgebung platziert.