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instrumentb2b>Lösung>Vergleich der Leistung herkömmlicher SPE-Säulen mit magnetischen Extraktionsmitteln mit Angiotensin I-Extraktion
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Verwendung von AngiotensinenIchVergleichen Sie die Extraktion mit der TraditionSPEEigenschaften von Säulen und magnetischen Extraktionsmitteln

Schlüsselwörter

AngiotensineIchFlüssigchromatografie, Massenspektrometrie, Feststoffextraktion,Angiotensin IAng IReninLC-MS/MSSPE

Vorwort

AngiotensineIchAng Iist einer der häufigsten klinischen Marker, durch die AngiotensinIchDer Test der Extraktionseffekte kann die klinische Anwendbarkeit und technische Leistung verschiedener Probenbehandlungsmittel effektiv bewerten.

Dieser Artikel vergleicht eine bekannte ImportmarkeHLB 96BitSPEPoröse Platten undHLBMagnetismusSPEExtraktionsmittelAng IDie unterschiedlichen methodischen Indikatoren des Versuchs verglichen intuitiv die Leistung beider. Auch für klinischeSPEDie Entwicklungsperspektiven für die Vorbearbeitungstechnik der Probe bieten einen sehr wertvollen Hinweis.

Experimentales Design

Wie in der folgenden Tabelle gezeigt, verwenden1% BSAVorbereitung von vier KonzentrationsniveausAng ISerie von Standardlösungen ergänzt durch stabile Isotope-MarkierungenAng IInnere Marke.

Ang I

Konzentration (g

Konzentration (g

LOQ

0.5

10

Niedriges Niveau (L

7.5

10

Mittelstufe (M

30

10

高水平(H

80

10

Setzen Sie die folgenden BedingungenSPEFür eine bekannte ImportmarkeHLB 96BitSPEPoröse Platten. Verwenden Sie den passenden Druck96LöcherSPEBedieneinrichtungen führen Proben durch.

Name

Operation

Aktivieren

verwenden500 μLMethanol AktivierungSPEBrett zweimal

Gleichgewicht

verwenden500 μL5%Aktivierung der Formsäure-WasserlösungSPEBrett zweimal

Auf

500 μL LOQniedrig (Lmittleren (M(hoch)H(oben)

Waschen1

verwenden500 μL5%Formensäure Wasserlösung WaschenSPEBrett zweimal

Waschen2

verwenden500 μL20%Methanol Wasserlösung WaschenSPEBrett zweimal

Entfernen

Jedes Loch hinzufügen250 μLMethanol, sammeln Sie die Entwaschungsflüssigkeit in96In der Platte

2.png

Entsprechend, fürAUTO M32Vollautomatischer Extraktor setzt das folgende Verfahren für die Ausführung der Probe, jede Probe verwendet2 mg HLBMagnetische Extraktionsmittel.

Befehl

Lösungen

Lochpositionen

Dosierung (μL

Aktivieren

Methanol

1

500

Gleichgewicht

5%甲酸水溶液

2

500

Auf

Probenlösung

3

500

Waschen1

5%甲酸水溶液

4

500

Waschen2

20%Methanol Wasserlösung

5

500

Entfernen

Methanol

6

250

Entfernung

/

2

600

3.png

Daten und Vergleiche

Wiederholen Sie die Extraktion der vier Standardproben, die im Experiment-Design beschrieben sind, jeweils dreimal und vergleichen Sie die Extraktion der beiden Vorbehandlungsmethoden inLC-MS/MSDie oben gemessene relative Standardabweichung zeigt die Ergebnisse in der folgenden Abbildung. Darunter ist die linke blaue Säule für die Verwendung einer berühmten ImportmarkeHLB 96BitSPEDie Messung nach der Extraktion der porösen Platte, die orange Säule auf der rechten Seite ist die Messung nach der Extraktion mit magnetischem Extraktionsmittel.

4.png

5.png

Bildb, Niedrige Reproduzierbarkeit (L)

6.png

7.png

Es kann gesehen werden, dass die beiden Vorbehandlungsmethoden keinen signifikanten Unterschied in der äußeren Spitzenbereich, der inneren Spitzenbereich und der berechneten Konzentration haben, aber das Ergebnis des magnetischen Extraktionsmittels ist auf den meisten Ebenen etwas besser als die herkömmliche.96BitSPEPoröse Platten.

Im Vergleich der Extraktionsraten wählen wir eine bekannte ImportmarkeHLB 96BitSPEDie gemessene Spitzenfläche nach der Extraktion der porösen Platte ist ein Benchmark (100%Die gemessene Spitzenbereich nach der Extraktion mit magnetischem Extraktionsmittel wird mit diesem verglichen. Wie in der folgenden Abbildung gezeigt, ist die linke blaue Säule für die Verwendung einer berühmten ImportmarkeHLB 96BitSPEDie Messung nach der Extraktion der porösen Platte, die orange Säule auf der rechten Seite ist die Messung nach der Extraktion mit magnetischem Extraktionsmittel.

8.png


Schließlich werden die LOQ-Ebenen in der folgenden Abbildung gezeigt, nachdem die beiden Methoden extrahiert wurden, die MRM-Chromatogramme in LC-MS/MS erhalten. Abbildung a zeigt ein Chromatogramm mit herkömmlichen 96-Bit-SPE-porösen Platten und Abbildung b ein Chromatogramm mit magnetischen Extraktionsmitteln. Es ist zu sehen, dass bei allen Konzentrationsniveaus die gemessene Spitzenbereich der magnetischen Extraktionsmittel deutlich besser ist als die herkömmliche96BitSPEPoröse Platten, alle über letzteres50%Das Höchst erreicht sogar etwa1.8doppelt.

9.png

Ergebnis Diskussion
Offensichtlich inLOQUnter dem Niveau der magnetischen Extraktionsmittel Extraktion erhält die Chromatografie Spitze höher als die herkömmliche96BitSPEDie poröse Plattenextraktion, die mit dem Extraktionsresultat im Einklang ist *.

Durch den Vergleich der oben genannten Daten können wir die Ergebnisse wie in der folgenden Tabelle beschrieben erhalten.

Absolute Wiederholbarkeit

Relative Wiederholbarkeit

Extraktionsrate

LOQQualität

Betriebsmodus

Bekannte Importmarken96BitSPEPoröse Platten

Besser

Besser

Mittelmäßig

Mittelmäßig

manuell+Negativdruckeinrichtung

Magnetische Extraktionsmittel

Besser

Besser

Gut50%über

Besser

Kleine manuelle Menge+Automatische Ausrüstung


Besser als eine bekannte Importmarke.HLB 96BitSPEPoröse Platten. gleichzeitigAUTO M32Die „einmaligen Pipetten“ und „unbeaufsichtigten“ Betriebsmodus, die dem vollautomatischen Extraktor inhärent sind, reduzieren die menschliche Beteiligung an der Vorbehandlung der Probe und verbessern gleichzeitig das Automatisierungsniveau erheblich.