1. Alltagliche Betriebsvorschriften
Vorbereitung und Prüfung von Reagenzien
Stellen Sie sicher, dass die Reagenzflaschen (z. B. Acetonitril, Aktivierungsmittel, Oxidationsmittel) gut versiegelt sind und dass der Druck des Argons stabil ist, um den Eintritt von Außenluft zu verhindern, die die Synthese beeinflusst.
Prüfen Sie vor der Synthese den Reagenzgehalt und ersetzen Sie die leere Flasche rechtzeitig, um zu vermeiden, dass die Synthese aufgrund eines Mangels an Reagenzien unterbrochen wird.
Sequenzeingang und Parametereinstellung
Eingabe der ZielDNA-Sequenz mit Computergestützter Entwurfssoftware unter Berücksichtigung der Kryptonpräferenz, der Sekundärstruktur und der Einschränkung der Enzymstellen.
Stellen Sie sicher, dass die Syntheseschritte (z. B. Entschutz, Kupplung, Verschluss, Oxidation) korrekt sind, und wählen Sie die Endmethode (z. B. TritylOnAuto behält die 5'-DMT-Gruppe für die spätere Reinigung).
Syntheseprozessüberwachung
Führen Sie vor dem Start den Schritt StartColumn aus, um zu überprüfen, ob die Position der Synthesezäule korrekt ist.
Die DMT-Ionen-Freisetzung wird während der Synthese über einen elektrisch leitenden Strömungsbecken überwacht, um den Reaktionsvorgang zu beurteilen.
Überprüfen Sie regelmäßig, ob Temperatur, Druck und andere Parameter im normalen Bereich liegen.
Produktverarbeitung
Nach Abschluss der Synthese wird das Produkt vom Festphasenträger geschnitten und kurze Fragmente und Salzionen mit OPC-, PAGE- oder HPLC-Reinigung entfernt.
Nach der Reinigung wird das Produkt aufgeteilt und aufbewahrt, um wiederholtes Einfrieren zu vermeiden.
2. Tägliche Wartungspunkte
Flaschenstecker "O"-Ring
Überprüfen Sie es einmal im Monat und ersetzen Sie es mindestens einmal im Jahr. Wenn weiße Abfälle auftreten, waschen Sie mit Acenitrilbaumwolle.
Der alte Ring wird beim Austausch mit einer Blutstopfklemme festgehalten, um sicherzustellen, dass der neue Ring nach dem Einstecken ohne Partikel installiert ist, und eine Druckprüfung durchgeführt wird.
Flaschen und Leitungen
Halten Sie die Flasche sauber und überprüfen Sie regelmäßig den Argondruck und die Gasdichte der Leitungen.
Reinigen Sie die Leitungen vor der Synthese mit einem neuen Reagenz, um zu verhindern, dass alte Reagenzreste die Reaktion stören.
Durchflussschutzventil
Einmal im Monat reinigen, zuerst 15 Minuten im Wasser kochen und dann mit Methanol-Ultraschall reinigen, um Verstopfungen zu verhindern.
Gerätereinigung und Staubschutz
Wäschen Sie das Gehäuse wöchentlich mit einem nassen Tuch, um die Lüftungsöffnungen zu vermeiden; Nach dem hohen Empfindlichkeit-Experiment sterilisieren Sie den Reaktionsraum mit UV-Licht für 15 Minuten.
Wenn Sie nicht länger verwenden, starten Sie 1-2 mal pro Woche, jeweils etwa eine halbe Stunde, um die Feuchtigkeit der Komponenten zu verhindern.
3. Häufige Fehlerbehebung
Niedrige synthetische Produktivität
Ursache: Ausfall des Reagents, Leitungsleckage, Positionsabweichung der synthetischen Säule.
Lösung: Austausch des Reagents, Überprüfung der Gasdichtheit der Rohrleitung und Neukalibrierung der Position der Synthesezäule.
Mangelnde Reinheit des Produktes
Ursache: falsche Reinigungsmethode, falsche Syntheseschritte.
Lösung: Optimieren Sie die Reinigungsbedingungen (z. B. Erhöhung der HPLC-Reinigungsschritte) und überprüfen Sie, ob die Syntheseparameter korrekt sind.
Alarm oder Unterbrechung des Geräts
Ursache: Abflüssigkeitsflaschen sind zu voll, Stromversorgungsschwankungen, Temperaturanomalien.
Lösung: Entleeren Sie die Abflüssigkeitsflasche, verwenden Sie eine regulierte Spannungsversorgung und überprüfen Sie, ob der Temperatursensor fehlerhaft ist.
Datenabweichungen (z. B. Schwankungen der Leitfähigkeit)
Ursache: Verschmutzung des Leitbeckens, Mischung von Reagenzien in Verunreinigungen.
Lösung: Reinigen Sie den Leitbecken, ersetzen Sie ein neues Reagenz und kalibrieren Sie es erneut.
4. Betriebsmaßnahmen
Sterile Umgebung: Die Vorläufersynthese ist empfindlich gegen Verschmutzung, Handschuhe müssen bei der Bedienung getragen werden, um ausländische DNA- oder Enzymkontamination zu vermeiden.
Aufbewahrung von Reagenzien: Lösungsmittel wie Acenitril müssen vor Licht gehalten werden, Aktivierungsmittel und Oxidationsmittel müssen versiegelt werden, um Feuchtigkeit zu verhindern.
Datenaufzeichnung: Detaillierte Aufzeichnung der Sequenz, Reagenzinummer und Qualitätsprüfung für jede Charge, um Probleme zu verfolgen.