Der Protosynthesizer ist die Kernausrüstung des Molekularbiologielabors und sein effizienter und stabiler Betrieb ist für das Experiment von entscheidender Bedeutung. Die drei häufigsten Arten von Fehlern sind die Verstopfung von Rohrleitungen, Ventil-Leckage und Anomalien der Synthesedaten. Dieser Artikel analysiert dies kurz und bietet eine gezielte Lösung.
1. Verstopfung der Rohrleitung
Dies ist ein weit verbreiteter Fehler, der direkt zu einem Syntheseseiter führt.
Diagnose: In der Regel begleitet von ungewöhnlich hohem Zylinderdruck, schlechter Reagenzförderung, sehr niedriger Endrendiment oder kein Produkt.
Hauptgründe und Lösungen:
Verstopfung der synthetischen Säule: am häufigsten auftreten. Durch Abfälle von Monomer- oder Basislösungen, Trocknung von Säulenbetten oder Festkörpern. Lösung: Unterbrechen Sie die Synthese sofort und spülen Sie die Synthesesoulen und die Upstream-Leitungen umgekehrt oder vorwärts mit einem leistungsstarken Entblockierungslösungsmittel wie Acenitril, konzentrierter TCA-/Dichlormethanlösung. Täglich muss sichergestellt werden, dass das Reagenz frisch, wasserfrei ist und nach der Synthese vollständig gespült wird.
Mikroblockage von Rohrleitungen oder Ventilen: hoher Druck in bestimmten Reagenzreihen. durch Kristallisation oder Abbau verursacht. Lösung: Führen Sie das Reinigungsverfahren „Purge“ für ein spezifisches Reagenz durch oder entfernen Sie die reinigenden Ventilblöcke und Kapillarleitungen manuell.
2. Ventil- und Leitungsleckage
Leckagen führen zu ungenauer Dosierung von Reagenzien, Kreuzkontamination und sogar Beschädigung von Geräten.
Diagnose: Der Druck kann sich nicht aufbauen oder kontinuierlich abnehmen, Flüssigkeitsansammlung um die Reaktionssäule herum, niedrige Syntheseergebung und „fehlende“ oder falsche Einmischungen in der Sequenz.
Hauptgründe und Lösungen:
Alterung oder Verschleiß der Dichtungsringe: Die Rotor-Dichtungspassen oder die Dichtungsringe der Leitungsverbindungen von Ventilen (insbesondere Hauptverteilungsventilen) sind die häufigsten Leckpunkte. Lösung: Regelmäßiger, präventiver Austausch aller Schlüsseldichtungsringe gemäß dem Wartungsplan. Nach Entdeckung eines Lecks sofort Ausfall, entsprechende Dichtungsteile im Hinblick auf das Handbuch ersetzen.
Löse oder gebrochene Leitungsverbindungen: Überprüfen Sie, ob die einzelnen Steckverbindungen fest sind und ob Teflon-Kapillären Falten oder Risse aufweisen. Lösung: Befestigen oder ersetzen Sie beschädigte Leitungen.
Anomalie der synthetischen Daten
Es zeigt sich als niedrige Leistung und schlechte Reinheit (insbesondere der Ausfall der langen Ketten), aber das Instrument hat keinen Alarm.
Diagnose: HPLC/Massenspektrometrie zeigt, dass das Produkt nicht korrekt ist, dass die Abkürzung der Sequenz vielfältig ist oder dass die Ausbeute in voller Länge deutlich niedriger ist als erwartet.
Hauptgründe und Lösungen:
Reagenziprobleme (am häufigsten): Abbau der Monomerlösung (insbesondere G-Monomer), Ausfall des Aktivierungs- oder Oxidationsmittels und übermäßiger Acenitrilwassergehalt. Lösung: Verwalten Sie die Reagenzien streng, verwenden Sie frische, hochreine, wasserfreie Reagenzien und Acenitril und ersetzen Sie das Trocknungsmittel regelmäßig.
Unwirksamkeit beim Entkappen/Entschützen: Unzureichende Konzentration oder falsche Zeiteinstellung der Entkappenflüssigkeit oder des endgültigen Schnitt-/Entschützungsmittels wie Ammoniak-Konzentration. Lösung: Stellen Sie sicher, dass die Reagenzgestaltung genau ist und überprüfen Sie, ob das Entschutzreaktionsverfahren angemessen ist.
Software- oder Parameterfehler: Obwohl selten, können falsche Synthesesequenzen oder Zyklusparameter zu systematischen Ausfällen führen. Lösung: Überprüfen Sie vor jeder Synthese die Reihendateien und die Syntheseparametereinstellungen sorgfältig.
Zusammenfassung: Prävention ist besser als Behandlung. Regelmäßige Präventivwartungspläne (z. B. monatliche Reinigung, vierteljährlicher Austausch von Dichtungsringen, Überwachung der Gültigkeitsdauer von Reagenzien) und detaillierte Arbeitsprotokolle sind effektive Strategien, um Ausfälle zu minimieren und die Erfolgsquote und Qualität der Einführungssynthese zu gewährleisten. Bei komplexen Problemen sollten Sie sich rechtzeitig mit dem Gerätetechniker in Verbindung setzen.