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PCR-Prozessoptimierung
Datum:2025-06-17Lesen Sie:1

Die Wasserkrankheit gilt auch für den Steinfließer." - Enkelsoldatengesetz Wenn der Stein schnell genug ist, kann er auf der Oberfläche schweben. Letzten Monat haben wir ein wenig gesprochen, um die Temperatur zu senken (Optimierung des PCR-ProzessesOptimierung der PCR-Ergebnisse, heute eine andere Richtung, sprechen Sie darüber, wie man die PCR-Reaktionszeit zu komprimieren.

Vor der Komprimierungsdauer muss die Temperatur des Prüfrohres (Tube) / Moduls (Block) kontrolliert werden; Normal / Schnellmodus Mehrere Konzepte werden eingeführt. Im Folgenden zeigt sich das Modell Q9606.

Abbildung 1

Modul Temperatur:Bei der Abkühlung des Reaktionsleiters basiert die Echtzeittemperatur des Moduls.

Testrohrtemperatur:Bei der Abkühlung der Reaktionsleiter wird die Echtzeittemperatur des Reaktionsmittels im Reaktionsrohr angegeben.


图片2.png


Abbildung 2


图片3.png


Abbildung 3

Wenn die experimentelle Bearbeitung abgeschlossen ist, klicken Sie auf die Schaltfläche Ausführen, um ein Feld (wie in Abbildung 2) zu öffnen, um zu wählen, ob der Schnellmodus oder der Normalmodus.

Beispiel für das Verfahren in Abbildung 3:

Schnellmodus:Die Erhöhungskühlgeschwindigkeit des Instruments beträgt 8 ° C / s, was ein volles Betriebsexperiment der Erhöhungskühlgeschwindigkeit anzeigt.

Normales Modell:Die Erhöhungskühlgeschwindigkeit des Instruments beträgt 4 ° C / s, was das halbe Betriebsexperiment der Erhöhungskühlgeschwindigkeit anzeigt.

Verschiedene Anwendungsszenarien wählen verschiedene Kombinationen von Reaktionsmustern aus. Im Folgenden können Sie ein paar Reaktionsprozesse teilen, wie Sie schnelle Reagenzien abbrechen können.

Zunächst wird die Kombination aus der Auswahl des Schnellmodus + der Modultemperatur der Gerätelaufstellung die Reaktionszeit komprimieren. Zweitens, unter der Voraussetzung, dass die Gesamtdauer unverändert ist, verteilen Sie die Dauer der Veränderung und Verlängerung des Zyklussegments vernünftig. Schließlich wird auf der Grundlage der zweiten Auswahl der verfügbaren Reaktionsverfahren fein angepasst, um die Reaktionszeit erneut zu verkürzen oder die Reaktionszeit unter den Bedingungen, die die Gesamtdauer zulässig ist, angemessen zu verlängern, um den Reaktionseffekt zu erreichen.

Da das Amplifikationsenzym für schnelle Reagenzien eine schnellere Dehnungsgeschwindigkeit als das Enzym für gewöhnliche Reagenzien aufweist, kann eine erhebliche Kompression bei der Einstellung der Länge der Dehnungsreaktion durchgeführt werden. Bei der Kompression der Veränderungsreaktionsdauer muss beachtet werden, da die Wahl der Modultemperatur ist, wenn die Veränderungsdauer zu kurz ist, wird die tatsächliche Temperatur des Reagents unter 95 ° C oder 95 ° C nicht ausreichend bleiben, was zur Folge hat, dass die Schablone nicht ausreichend ist und die Akkumulation des Signals beeinflusst, so dass die Veränderungsreaktionsdauer nicht übertrieben werden sollte.

Die Q9600 Serie ist verfügbarHöchst 8 ℃ / secDie Erhöhung der Kühlgeschwindigkeit und die Funktion des isothermen Differenzgradienten (Abbildung 4) erfüllen die Entwicklung und Prüfung von herkömmlichen Reagenzien und bieten gleichzeitig eine gute Reaktionsplattform für schnelle Reagenzien.



Abbildung 4