Durch die strikte Einhaltung der oben genannten Betriebsvorschriften können die Bakteriendichte (typischerweise bis zu OD600 = 8-12), die Produktrendite und die Lebensdauer der Anlage erheblich verbessert werden. In der Praxis müssen standardisierte Prozesse mit spezifischen Stammphysiologischen Eigenschaften erstellt und laufende Protokolle für eine retroaktive Optimierung erstellt werden.

Im Folgenden sind die Details zur Verwendung von flüssigen Bakterien Schaukelbetten und die Schlüsselpunkte beschrieben:

Vorbereitung und Behälterbehandlung

1. Behälterauswahl und Sterilisierung

Bevorzugt wählen Sie eine Dreieckflasche (häufig 250-500 mL) oder einen Fenstertank, je nach Kulturvolumen in einem Verhältnis von nicht mehr als 70% des Behältervolumens. Glasgeräte müssen durch 121 ° C Hochdruckdampf sterilisiert werden 30 Minuten, Plastikflaschen können mit Ethanepoxid fumigiert werden, um zu vermeiden, dass Rückstandsinhibitoren das Bakterienwachstum beeinflussen.

2. Zubereitung des Kulturmediums

Konfigurieren Sie ein geeignetes Medium nach den Stammeigenschaften (z. B. LB-Medium für E. coli) und regulieren Sie den anfänglichen pH-Wert (allgemeine Bakterien pH 6,8-7,2, Pilzsäure). Um bestimmte Stoffwechselprodukte anzureichern, können Induktoren oder Vorläufer hinzugefügt werden.

Impfung und Beladungsvorschriften

1. Steriler Betrieb

Beenden Sie die Impfung im Biosicherheitsschrank, entfernen Sie nach dem Flammenbrennen den Baumwollstopfen, fügen Sie eine angemessene Menge an Bakterien (etwa 5% -10% der Impfmenge) an, verschließen Sie schnell und wechseln Sie durch das Übertragungsfenster in das Schaukelbett. Achten Sie darauf, dass die Betriebsdauer im Wirkungsbereich der Flamme der Alkohollampe gesteuert wird.

2. Symmetrische Balance-Belastung

Der Behälter mit Bakterienflüssigkeit wird symmetrisch auf das Schüttelbett platziert, um eine Balance der Last zu gewährleisten. Eine ekszentrische Belastung führt zu ungewöhnlichen Schwingungen des Motors und verkürzt die Lebensdauer der Maschine. Bei einer großen Volumenkultur wird empfohlen, die Leerplätze mit einem Gewichtsblock zu füllen.

Parametereinstellung und Überwachung

1. Temperaturregelung

Abhängig von der Einstellung der optimalen Wachstumstemperatur des Stammes (z. B. Schimmel 30 ° C, Thermophile 55 ° C), wird die Vorwärmfunktion gestartet, um den Temperaturunterschied innerhalb des Hohlraums ≤ ± 0,5 ° C zu erreichen. Überprüfen Sie die tatsächliche Temperatur alle 4 Stunden während des langen Betriebs, um einen Temperaturfehler zu vermeiden, der zum Tod der Bakterien führt.

2. Drehzahleinstellung

Gleichgewicht zwischen der Effizienz des gelösten Sauerstoffs und der Schädigung der Scherkraft: Normale Aroxygen stellen 200-300 Umdrehungen pro Minute fest, und seidenförmige Pilze können unter 150 Umdrehungen per Minute eingestellt werden; Die anaerobe Kultur muss auf 80-120 Umdrehungen pro Minute reduziert und mit Stickstoff ersetzt werden. Beobachten Sie die Schaumstoffbildung und fügen Sie bei Bedarf Schaumdämpfer hinzu.

3. Zeitprogrammmanagement

Mit segmentierter Zeitkontrollstrategie: Verzögerungsphase (0-6h) niedrige Geschwindigkeitsanpassung, Logarithmus auf die Zieldrehzahl erhöht, die Stabilitätsperiode verlangsamt, um die Phase der Enzyme-/Sporenbildung zu verlängern. Stellen Sie die Bremsung 15 Minuten im Voraus ein, um zu verhindern, dass ein Sturz einen Wirbelstrom auslöst.

4. Betriebsprozessmanagement

1. Zustandskontrolle

Prüfen Sie stündlich die folgenden Elemente: ① ob die Festlegung losgelassen ist; ② Kondensatwasserauslösung; Änderung der Flüssigkeitshöhe in der Flasche (Beurteilung der Verdunstungsgeschwindigkeit); Außergewöhnliche Geräusche oder Gerüche.

2. Zeitsteuerung der Ergänzung

Unter Anwendung einer Strategie der intermittenten Zusatzströmung wird die Kohlenstoff-/Stickstoffquelle durch sterile Silikonrohre ergänzt, wenn die DO-Elektrode einen abrupten Abfall des gelösten Sauerstoffs anzeigt. Das Ergänzungsvolumen übersteigt nicht einmal 10% des Arbeitsvolumens, um Penetrationsdruckmutationen zu vermeiden.

3. Verschmutzungsschutz

Es wurde festgestellt, dass die Trübung ungewöhnlich erhöht ist, sofort die Kultur beenden und die Proben spekulativ abnehmen, um die Verschmutzung zu bestätigen. Bei schwerer Verschmutzung sollten Sie zuerst die Innenwand des Schaukelbettes mit einer Desinfektionslösung wischen, und dann nach 30 Minuten mit UV-Strahlung weiterverwenden.

V. Ernte und Nachbehandlung

1. Probenahme

Verwenden Sie die Bohnsampfungsmethode oder die Spritze zur seitlichen Probenahme, um zu vermeiden, dass die Abfälle am Boden gestört werden. Die Wege vor und nach der Probenahme erfasst die Veränderung des Feuchtgewichts und konvertiert die Biomasse-Akkumulationskurve.

2. Abfallbehandlung

Der Druckbehälter muss erst gedruckt werden, bevor er geöffnet wird, und die Kultur, die pathogene Faktoren enthält, sollte nach 30 Minuten nach 121 ° C-Inaktivierung freigegeben werden. Die Metallklammern werden mit 75% Ethanol getränkt desinfiziert und die Kunststoffteile ersetzt werden durch spezielle Müllbeutel verschlossen.

3. Wartung der Ausrüstung

Monatliche Reinigung von Staub auf dem Ventilator-Filter, vierteljährliche Reparatur der Antriebsgurtspannung. Entleeren Sie den Tank bei langer Nichtnutzung und tragen Sie Silikon auf, das rostfrei ist, und das digitale Display ist mit einer staubfesten Abdeckung abgedeckt.