Mikrogravitationszellkultur Kernmethoden zur Vermeidung der Zellversammlung

1. Optimierung der Impfdichte: Kontrollieren Sie die anfängliche Zellkonzentration bei 1 x 104 ~ 5 x 105 Zellen / ml (je nach Zelltyp angepasst), um zu vermeiden, dass eine zu hohe Konzentration zu einer natürlichen Aggregation führt.

2. Wählen Sie das geeignete Medium aus: Fügen Sie eine angemessene Menge an Antipolymeren hinzu (z. B. 0,1% ~ 0,5% Methylcellulose, Pralandozucker) oder verwenden Sie ein niedriges Serum- / serofreies Medium, um die proteinvermittelte Haftung zu reduzieren.

3. Verbesserung des dynamischen Gleichgewichts des Kultursystems: Nutzen Sie die präzise Geschwindigkeitssteuerungsfunktion von TDCCS-3D, um eine milde Drehung von 5 bis 20 Umdrehungen pro Minute aufrechtzuerhalten und die Zellen durch die Flüssigkeitsscherkraft zu verteilen; 1/3 des Mediums regelmäßig ersetzen, um den Stoffwechsel Abfälle und Aggregationsinduktoren zu beseitigen.

4. Vorbehandlung von Zellen und Behältern: Vor der Impfung verdauen Sie die Zellgruppen sanft mit Pansenzymen, um den Zustand der Einzelzellsuspension zu gewährleisten; Kultivieren Sie die Flascheninnenwände für eine hydrophile Behandlung oder Beschichtung (z. B. Polylysin), um die Wahrscheinlichkeit, dass die Zellwände sich wiedervereinen.

5. Präzise Regulierung der Kulturumgebung: pH 7,2 ~ 7,4, Temperatur 37 ° C ± 0,5 ° C aufrechterhalten, um Umweltschwankungen zu vermeiden, die Zellstressansammlung auslösen; Einige Zellen können EDTA (0,02%) zur Unterstützung der Dispersion hinzugefügt werden.