In der mikroskopischen Welt des Lebens hilft ein präzises Gerät, das das Hexagonal Liposose Level Elektrophoremeter genannt wird, Forschern mit seiner stabilen und zuverlässigen Trennfähigkeit, molekulare Informationen von DNA und RNA zu interpretieren. Als eine der grundlegenden Ausrüstungen des Labors für Molekularbiologie übernimmt das Elektrophoremeter für die Isolierung und Identifizierung von Nukleinsäuremolekulen eine wichtige Aufgabe.
01 Arbeitsprinzip: Der molekulare Tanz im elektrischen Feld
Das Kernprinzip eines Epoxyglycerol-Elektrophoremeters basiert auf der Synergie von Ladungseffekten und molekularen Siebeffekten. Nukleinsäuremolekule (DNA/RNA) tragen eine negative Ladung in einer Lösung, die über ihren Isopunkt liegt, und wenn sie in ein elektrisches Feld gesetzt werden, bewegen sich diese negativ geladenen Moleküle zur Anode.
Die dreidimensionale Netzstruktur, die durch das Gel entsteht, fungiert als "molekulares Sieb". Unter der Wirkung eines elektrischen Feldes bewegen sich Nukleinsäuremoleküle unterschiedlicher Größe in den Gelporen unterschiedlich: Kleinere Moleküle bewegen sich schneller und größere Moleküle bewegen sich langsamer.
Dieser Isolationseffekt ermöglicht es den Forschern, ihre Molekulargeröße anhand der Position des Nukleinsäureschnitts auf dem Gel zu beurteilen und das Molekulargewicht der zu messenden Probe zu bestimmen, wobei die Migrationsgeschwindigkeit umgekehrt zum relativen Molekulargewicht verhältnismäßig ist.
02 Werkzeugentwicklung:
Das Elektrophoremeter für Lipososen-Spiegel von Six-One hat eine Reihe praktischer Innovationen in sein Design integriert. Sein brückenförmiges Design spart effektiv den Pufferverbrauch und sorgt gleichzeitig für eine gleichmäßige Verteilung der elektrischen Felder. Die offene Konstruktion des transparenten Deckels ermöglicht sowohl die Wärmeabkühlung als auch die Echtzeitbeobachtung der Elektrophoresis während des Experiments.
Das Elektrodensystem ist der Kernbauteil des Elektrophoresemeters, und die Produkte von Six One verwenden Platin-Elektrodendraht mit einer Reinheit von ≥99,95%, um eine ausgezeichnete Leitfähigkeit und Haltbarkeit zu gewährleisten. Der Elektrodenhalter ist abnehmbar und lässt sich leicht reinigen und reparieren, was die Lebensdauer der Anlage verlängert.
In Bezug auf die Sicherheitsleistung ist das Six-One-Elektrophoremeter mit einer hochflexiblen Leitung und einem offenen Deckel ausgestattet, um eine sichere Betriebssicherheit zu gewährleisten. Gel-Palette mit Fluoreszenzgeräten für die Beobachtung und Aufzeichnung der Ergebnisse. Das Gehäuse wird aus Polycarbonat gespritzt, ist hochtemperaturbeständig und nicht verformt, ohne Leckergefahr.
03 Produktreihe und technische Parameter
Es gibt eine Vielzahl von Elektrophoremetern für den Niveau von Gonadotrophin, die unterschiedlichen experimentellen Anforderungen gerecht werden. Die Formgröße des Typs DYCP-31CN beträgt 260 x 116 x 76 mm, die Spezifikation der Gelplatte ist 100 x 70 mm oder 50 x 70 mm und die Gesamtkapazität des Puffers ist etwa 260 ml.
Der Typ DYCP-31DN ist vielfältiger und ermöglicht die Herstellung von Gelen in vier verschiedenen Größen: 120 x 120 mm (großer Klebstoff), 120 x 60 mm (breiter Klebstoff), 60 x 120 mm (langer Klebstoff) und 60 x 60 mm (kleiner Klebstoff). Diese mehrdimensionale Auswahl ermöglicht es, sich an eine Vielzahl von Anforderungen an Probenmassen anzupassen.
Der Typ DYCP-32A ist ein mittelgroßes Elektrophoremeter mit einer Formgröße von 300 x 162 x 110 mm, einer Gelplattenspezifikation von 160 x 100 mm und einer Gesamtkapazität von 650 ml Puffer. Dieses Modell verwendet eine Platinelektrode mit symmetrischen Elektroden, mit einem Elektrodenabstand von 10 cm, die eine stabile Gleichstromspannung von 0-150 V ausgibt, und einen Fehler der Gleichmäßigkeit der elektrischen Feldstärke von ≤ 5%, um eine klare Trennung der Streifen sicherzustellen.
04 Betriebsprozess: Vom Klebstoff bis zur Bildgebung
Der Betriebsprozess des Elektrophoresers für den Niveau von Jupiter beginnt mit der Gelzubereitung. Zunächst wird die angemessene Menge an Aganasepolver in den Elektrophorespuffer (normalerweise TAE oder TBE) gewogen, aufgeheizt und auf 50-60 ° C abgekühlt, in die Kleberform gegossen und in den Kamm eingesetzt.
Nach der Kondensation des Gels wird der Kamm entnommen, um ein Musterloch zu bilden. Wenn Sie den Kamm ziehen, sollten Sie achten, dass Sie zuerst die Seite leicht geneigt und dann ganz entfernt haben, um zu vermeiden, dass das Probenloch beschädigt wird. Legen Sie das Gel in den Elektrophoresbecken und fügen Sie Puffer hinzu, um das Gel einzutauchen, die Flüssigkeitsfläche sollte 1-2 mm höher als die Geloberfläche sein.
Als nächstes geht es um Probenvorbereitung und Probenahme. Nachdem die Nukleinsäureprobe mit dem obigen Probenpuffer vermischt wurde, wurden die Probenlöcher mit einem Spurenpipett hinzugefügt. Glycerin oder Saccharose in dem oberen Probenpuffer erhöht die Probendichte, so dass die Probe in den Probenboden versenkt wird; Spurfärbstoffe (z. B. Bromophenolblau) werden verwendet, um den Elektrophoreseprozess anzuzeigen.
Die Einstellung der Elektrophoreseparameter muss den experimentellen Anforderungen entsprechend angepasst werden. Normalerweise wird die Spannung auf 5-10V / cm (Gellänge) eingestellt und die Elektrophorese dauert 30-120 Minuten. Wenn Sie die Stromversorgung anschließen, sollten Sie auf die Polarität der Elektrode achten: die negative Pole am Ende der Probe-Bohrung und die positive Pole am anderen Ende.
Schließlich die Beobachtung und Analyse. Nach der Elektrophoresis wird das Gel durch Nukleinsäurefarber wie EB oder SYBR Green gefärbt und anschließend unter einem UV-Gel-Bildgebungssystem beobachtet und fotografiert. Durch den Vergleich mit DNA/RNA-Markern können die Größe und der Gehalt der Nukleinsäureschnitte der Probe bestimmt werden.
05 Anwendungsszenarien: Grundwerkzeuge für mehrere Bereiche
In der Genomischen Studie wird ein Elektrophoremeter für die Isolierung und Identifizierung von DNA-Fragmenten verwendet, um die Struktur und Funktion des Genoms aufzudecken. Auch die klinische Diagnose ist von diesem Werkzeug unabhängig. Durch die Elektrophorese von Serum, Urin und anderen Proben kann die Erkrankungsmarker schnell und genau erkannt werden und die Frühdiagnose der Erkrankung verbessert werden. In den Genklon- und Träger-Konstruktionsexperimenten können Modelle wie DYCP-32A die Effizienz der Enzymektion und die Produktintegrität überprüfen, um die Erfolgsquote der anschließenden Verbindungen und Transformationsexperimente zu gewährleisten und die "Gateway" für Genklon-Experimente zu sein. Im Lehrbereich ist die Bedienungsfreundlichkeit und die Ergebnisstabilität des Elektrophoresers Six-One die ideale Wahl für experimentelle Kurse in der Molekularbiologie an Universitäten, um den Schülern zu helfen, die Prinzipien der Elektrophorese und die experimentellen Techniken zu beherrschen.