Synthetische Polypeptide sind eine wachsende Klasse von Biotherapeutika. Glycogenähnliches Peptid-1 (GLP-1) Agitatoren sind eine Klasse von synthetischen Polypeptiden, die das natürliche GLP-1-Hormon simulieren und eine wichtige Rolle bei der metabolischen Regulierung spielen, die sowohl die Insulinsekretion fördert als auch zur Gewichtsabnahme beiträgt [1]. Da GLP-1-Moleküle anfällig für mehrere Abbauungswege sind, ist die Bewertung der Qualität und Stabilität von GLP-1-Behandlungsmitteln entscheidend, um ihre Wirksamkeit zu gewährleisten.

Derzeit wird das UV-Spektrum verwendet, um Veränderungen im Polypeptid-Absorptionsspektrum zu erkennen und damit ihre Stabilität zu überwachen [2]. Diese zerstörungsfreie Prüftechnik bietet erhebliche Vorteile für den Arbeitsablauf: So bleibt beispielsweise wertvolle Proben nach der Analyse intakt und kann weiterhin für ergänzende technische Analysen wie die Zusammensetzung von Flüssigkeiten verwendet werden. Darüber hinaus ist die UV-sichtbare Spektralerkennung schnell und einfach zu bedienen, was Benutzern aller Fähigkeitsstufen und Berufshintergrund zugänglich ist.

Bei der Überwachung kleiner Veränderungen in Biomolekülen, die durch Umweltfaktoren wie oxidativen Stress verursacht werden (z. B. eine leichte Verschiebung der Absorptionsspitzenposition oder eine leichte Änderung der Intensität), sind herkömmliche UV-sichtbare Absorptionsspektraldaten oft schwierig zu analysieren. Darüber hinaus ist die Schwierigkeit der Spektralspitze zu unterscheiden eine große Herausforderung für die Analyse, wenn das biomolekulare Spektrum mehrere überlappende Komponenten enthält. Diese Einschränkungen werden durch die Verbesserung der mikrospektralen Eigenschaften überwunden, indem die Derivate-Spektraltechnologie in der Lage ist, schwer zu unterscheidende überlappende Spitzen im herkömmlichen Absorptionsspektrum effektiv zu unterscheiden.

Das Agilent 3500 Multi-Pool UV-sichtbare Spektrophotometer ist mit einem Multi-Pool-Modul ausgestattet und bietet eine leistungsstarke Werkzeuge für die biomolekulare Analyse in Kombination mit der Funktion der Messung von sekundären Derivaten. Das Gerät kann mehrere Proben unter den gleichen Bedingungen gleichzeitig messen, einschließlich Standardprodukte, Proben und Kontrollen. Die integrierte Gleichungsberechnung der Agilent Cary UV Workstation-Software zur Steuerung des Cary 3500-Pool-UV-sichtbaren Spektrophotometers generiert nach Absorptionsmessungen automatisch sekundäre Ableitungsspektre, um Berechnungsfehler zu minimieren und eine effiziente Datenverarbeitung zu ermöglichen.

Diese Anwendungsbericht zeigt, wie die fortschrittlichen Funktionen des Cary 3500 Multi-Pool UV-sichtbaren Spektrophotometers in Kombination mit der UV-sichtbaren Zweiter-Reihe-Derivate-Spektrotechnologie effektiv die Auflösung von überlappenden Absorptionsspitzen von Polypeptiden und aromatischen Aminosäuren verbessern können.